Как берут соскоб на хламидиоз у кошки

Развитие воспаления конъюнктивальной оболочки глаз у домашнего питомца провоцирует бактерия Chlamydophila Felis. Кошка заражается, охотясь на птиц или мышей, при контакте с калом, слюной или мочой больного грызуна или пернатого. Инфицирование другим микробом Chlamydophila psittaci, что приводит к поражению внутренних органов, происходит и через половые пути. Котенок может заразиться хламидиозом при родах или в утробе матери.

Болеют и домашние животные, хозяева которых никогда не выпускают питомцев на улицу. Возбудитель хламидиоза заносится в комнату с обувью, одеждой, сумкой владельца. Питомцы, гуляющие вместе с бродячими кошками, заражаются гораздо чаще. Хламидии имеют такую же клеточную оболочку, как и грамотрицательные бактерии, но элементарные тельца, как и у вирусов, у них состоят из одной молекулы ДНК. Эти микроорганизмы опасны для человека со слабым иммунитетом, ухаживающего за инфицированным животным.

Во внешней среде хламидии живут до полутора суток. Паразиты погибают за минуту, если попадают в кипяток. Уничтожают вредоносные микробы:

• ультрафиолетовые лучи;
• хлорамин;
• фенол.

При проникновении в организм кошки хламидии внедряются в клетки эпителия слизистых желудка, кишечника, мочевого пузыря, полости рта и глотки, в конъюнктивальную оболочку, где разрушают их защиту и начинают размножаться, что происходит в виде бинарного деления.

Внимание! Скрытый период инфицирования внутриклеточными микробами продолжается 1-2 недели.

Симптомы

На начальных этапах хламидиоз можно спутать с простудой или другой патологий, но нередко он протекает вообще бессимптомно, особенно это касается пищеварительного тракта. Признаки болезни отсутствуют, но вместе с калом и слюной у кошки выходят хламидии, которые попадают в окружающую среду.

Питомец не набирает вес, выглядит истощенным, иногда хромает, отказывается от любимого корма. Если хламидиоз приобретает хронический характер у кошки постоянно красные глаза, в уголках образуется корочки красновато-кирпичного цвета.

Острая форма патологии проявляется более выражено, клиническая картина зависит от того, какие органы поражены хламидиями.

Внимание! Игнорирование признаков поражения органов зрения приводит к воспалению роговицы или появлению катаракты, которая нередко заканчивается слепотой.

Уход за кошкой во время болезни

Любимцев, зараженных хламидиозом, изолируют от других питомцев и не выпускают на улицу.

Изменение в кормлении

Чтобы не допустить развития дисбактериоза в рацион кошки добавляют йогурты и другие кисломолочные продукты, в которых присутствуют лактобактерии. Питомцу нужно давать куриный бульон и жидкие лечебные корма, так как в них легче добавить лекарства в твердой форме, предварительно измельченными в порошок.

Личная гигиена

Помещение, где находится зараженное хламидиозом животное, необходимо обработать дезинфицирующими средствами. Нужно более тщательно следить за гигиеной больной кошки, чаще убирать лоток. Хозяину надо чистить обувь при входе в квартиру, обязательно мыть руки с мылом после контакта с питомцем.

Желательно не сильно тревожить больное животное (меньше играть с ним и не подпускать к любимцу семьи маленьких детей).

Опасность для человека

Если игнорировать гигиену при уходе за больным питомцем, домочадцы могут заразиться инфекцией, вызываемой хламидиями. Патология проявляется в виде воспаления конъюнктивы, но случается такое лишь при ослабленном иммунитете. Хламидиоз может привести к бесплодию у женщин. Поэтому необходимо не допускать никаких контактов с больными котятами беременных женщин, малышей и пожилых людей.

Опасность представляет хламидиоз, имеющий хронический характер, поскольку часто никто из членов семьи даже не подозревает, что кошка больна. Так у возбудителя есть больше времени, чтобы передаться члену семьи или другой кошке.

Важно! Возбудители хламидиоза у кошек и собак различны, поэтому кошка не может заразить хламидиями собаку.

• Катавак (Katavac Chlamydia).
• ХламиКон.

ВАЖНО. Для исключения ложных результатов перед сбором материала для ПЦР минимум 12 часов не нужно ничем обрабатывать слизистые. Также после вакцинации должно пройти 2-3 недели.

Понадобится:
1. пробирки типа Эппендорф 1,5 мл
2. обычные ватные палочки
3. физраствор (NaCl)

При наличии этих трех составляющих любой неравнодушный хозяин сможет взять материал для исследования через смывы или мазки.

Ниже примерная таблица заболеваний, на которые мы сможем взять анализы. Здесь есть некоторые тонкости, о которых я постараюсь чуть ниже упомянуть. Будет полезно хоть раз посмотреть, как это делают врачи в ветклиниках. Список может быть чуть больше, я беру лишь самые распространенные заболевания.

Заболевание — Способ взятия материала:

Панлейкопения (ПЦР) — Кал/ректальный мазок.
Калицивироз (ПЦР) — Соскобы с язв ротовой полости, смывы из носоглотки и ротоглотки, конъюнктивы глаз (кошки).
Микоплазмоз (ПЦР) — Смывы со слизистых, мокрота, выделения из носа и глаз.
Ринотрахеит (герпесвирус кошек 1 типа) (ПЦР) — Смывы со слизистых носоглотки, глаз, с изъязвлений ротовой полости, мокрота.
Токсоплазмоз (ПЦР) — Кошки — мазки из прямой кишки, фекалии; смывы с конъюнктивы.
Хламидиоз (ПЦР) — Смывы со слизистых (конъюнктивы, урогенитального тракта).

Смывы со слизистых и выделения берем с помощью ватных палочек, помещаем в пробирки Эппендорфа с 0,5 мл физраствора (обрезая пластиковую палочку).

Про сбор: головку ватной палочки смочить в физрастворе, а затем собрать анализ. Если не смочили, это не критично.

В идеале пробирки должны быть стерильными, но на практике это часто не так. Ни в Беланте, ни в Весте я ни разу не видела стерильных пробирок. В любом случае нам ничто не мешать обдать кипятком сами пробирки. Пластик в пробирках прочный, позволяет выдерживать высокую температуру.

ВАЖНО. Чтобы несколько раз ватными палками не раздражать слизистые животного — на микоплазмоз, кальцивироз, ринотрахеит, хламидиоз можно взять анализ одной палочкой в одну пробирку (в лаборатории они всё равно смешиваются).
На панлейкопению — отдельно 1 ватную палочку на 1 пробирку.

Чтобы лучше взять смывы с конъюнктивы, нужно немного оттянуть нижнее веко и плавно провести головкой ватной палочки. Если что-то скапливается в уголках глаз, желательно это добро подхватить на головку палочки. Стараемся проводить от чистых участков к грязным — НЕ наоборот.
Если у животного один глаз выглядит здоровым, а другой больным, то на 2 глаза используем 2 отдельных палочки или одной палочкой идем от чистого к грязному.

Чтобы взять ректальный мазок, ватная палочка на 1-2 см (зависит от размера животного) должна войти в анальный проход. Процедура эта не очень приятная, но если всё сделать быстро и правильно, то всё не так страшно.

Материал для анализов доставляем в лабораторию в день взятия или на следующий день. Допускают хранение в холодильнике (4°С) в течение 1-2 дней. Транспортировать анализы можно, обложив пробирки любыми замороженными овощами. Они не так текут, как чистый лед.

Понадобится:
1. пробирки типа Эппендорф 1,5 мл
2. обычные ватные палочки
3. физраствор (NaCl)

Срок исполнения

Хламидии — облигатные внутриклеточные бактерии рода Chlamydiales, которые вызывают главным образом конъюнктивит у кошек, но также могут играть роль в развитии системных и репродуктивных патологий у собак и кошек, которые до настоящего времени недостаточно хорошо изучены. Хламидии существуют в двух формах: элементарное инфекционное тельце, имеющее диаметр от 0,2 до 0,6 мкм, которое существует вне клетки, и ретикулярное тельце, имеющее больший размер (от 0,5 до 1,5 мкм), которое не является инфекционным и способно делиться в цитоплазме клеток хозяина до достижения зрелости — образования элементарного инфекционного тельца. Элементарные тельца способны выживать во внешней среде при комнатной температуре в течение всего нескольких дней и быстро инактивируются большинством дезинфектантов. Передача инфекции главным образом в основном происходит при прямом контакте, иногда путем, возможно инфицирование котят матерью после рождения. Контаминированные предметы играют важную роль в передаче инфекции при групповом содержании кошек.
Хламидии локализуются в эпителиальных клетках зрительной, дыхательной, пищеварительной и мочеполовой систем; сообщалось об инфекциях с поражением синовии. У одних видов хламидий имеется тенденция к видоспецифичности, другие виды могут вызывать инфекции у различных видов животных.
Наиболее значимым патогеном у кошек по всему миру является Chlamydophila felis, вызывающая острый и хронический конъюнктивит. Инфекция чаще всего наблюдается в условиях группового содержания кошек, особенно в питомниках. ДНК C. felis редко обнаруживается в мазках с конъюнктивы от клинически здоровых кошек. Имеются данные, согласно которым хламидии обнаруживаются у 30% кошек с конъюнктивитом. Инфекция C. felis чаще встречается у молодых кошек, главным образом, в возрасте от 2 до 12 месяцев. Защита от инфекции котят до двух месяцев обеспечивается материнскими антителами, хотя сообщалось о случаях неонатальных инфекций. У кошек старше 5 лет развитие инфекции C. felis очень маловероятно. Часто наблюдаются коинфекции с другими респираторными патогенами, такими как герпесвирус кошек 1 () и калицивирус кошек (FCV).
Неизвестно, возможна ли передача инфекции половым путем, как в случае с другими видами хламидий, однако у некоторых из инфицированных кошек микроорганизмы обнаруживаются в выделениях из влагалища. Также отмечаются выделения из прямой кишки и глаз.
После попадания элементарных инфекционных телец в организм животного они превращаются в ретикулярные тельца, которые размножаются с помощью простого деления с образованием включений, которые не подвергаются слиянию с лизосомами. Затем ретикулярные тельца вновь превращаются в элементарные тельца, которые высвобождаются во внеклеточное пространство после лизиса клетки и инфицируют другие клетки хозяина. Полный цикл репликации продолжается около двух дней.
Хламидии поражают главным образом эпителиальные клетки, однако могут инфицировать клетки эндотелия, гладкой мышечной ткани, лимфоциты, моноциты и макрофаги. C. felis размножается в цитоплазме эпителиальных клеток конъюнктивы, после чего с кровотоком микроорганизм проникает в миндалины, легкие, печень, селезенку, органы тракта и почки. Через 2–5 дней после инфицирования обычно наблюдается острый, хронический или рецидивирующий конъюнктивит, при этом регистрируются симптомы ринита, такие как выделения из носа и чихание. Клиническое состояние большинства кошек остается удовлетворительным, аппетит сохраняется. Симптомы поражения нижних отделов респираторного тракта, такие как кашель и диспноэ, наблюдаются в редких случаях, так же как кератит и изъязвление роговицы. Последние обычно вызываются коинфекцией таких патогенов, как .
После периода острого конъюнктивита инфекция может персистировать в течение многих месяцев, сопровождаясь слабо выраженным конъюнктивитом, либо симптомы болезни могут отсутствовать.
В одном исследовании хламидии были выделены из конъюнктивы через 215 дней после экспериментального инфицирования. Остается неясным, является ли хроническая форма заболевания результатом реинфицирования либо персистирования хламидий в организме. Коинфекции другими патогенами, такими как FCV, , Bordetella и Mycoplasma могут способствовать повышению тяжести заболевания и продолжительности периода выделения микроорганизма во внешнюю среду.
Остается неясным, может ли инфекция C. felis вызывать поражение репродуктивной системы у кошек. В этом могут играть роль такие факторы, как срок беременности, наличие коинфекции, например, , наличие иммуносупрессии, путь передачи инфекции, штамм микроорганизма.
Инфекции хламидий редко встречаются у собак. Сообщалось об инфекции Chlamydia psittaci у собак с респираторными заболеваниями, сопровождавшимися пневмонией и плевральным выпотом, а также кератоконъюнктивитом. В одном исследовании у группы сук с выделениями из глаз и признаками поражения нижних отделов дыхательных путей были случаи рождения мертвых щенков снижения размера помета. По результатам исследования мазков с конъюнктивы и глотки методом ПЦР была обнаружена C. psittaci.
Внедрение метода ПЦР в диагностике инфекций хламидий у животных было революционным прорывом ввиду его быстроты, чувствительности и специфичности. Дополнительным преимуществом является тот факт, что образцы для исследования не требуют специальных условий при транспортировке.
Существуют ПЦР, как стандартные, так и в реальном времени, в которых в качестве образца для исследования обычно используются мазки с конъюнктивы.
Необходимо иметь в виду, что после начала антибиотикотерапии в течение нескольких дней результаты ПЦР обычно остаются положительными. Использование растворов для местного применения, таких как проксиметакаин и флюоресцеин, не оказывает влияния на результаты исследования методом ПЦР в реальном времени на наличие инфекции C. felis, однако наблюдается незначительный ингибирующий эффект при использовании фузидовой кислоты. Ввиду того, что у некоторых кошек при отсутствии конъюнктивита возможно получение положительных результатов ПЦР на C. felis, интерпретация данных должна осуществляться с учетом данных анамнеза, наблюдаемой клинической картины и реакции на проводимое лечение.

Для диагностики данного возбудителя у кошек доступны следующие локализации:

• AN 339 НОС- в качестве биоматериала берут соскоб эпителиальных клеток слизистой носовой полости и помещают в микропробирку с транспортной средой. Образец стабилен при температуре +2.+8 ℃ до 10 дней;
• AN 339 ГЛЗ — в качестве биоматериала берут соскоб эпителиальных клеток конъюнктивы и помещают в микропробирку с транспортной средой. Образец стабилен при температуре +2.+8 ℃ до 10 дней;
• AN 339 БАЛ — смыв из бронхов, полученный путем БАЛ, хранится при температуре +2.+8 ℃ до 3 дней, в пробирке с ЭДТА.

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК С. felis.

Для диагностики данного возбудителя у кошек доступны следующие локализации:

Хламидиоз среди мелких домашних животных — достаточно распространённое заболевание, которое наиболее часто встречается у кошек. Заболевание может протекать без проявления основных клинических признаков, в скрытой форме с достаточно длительным персистированием возбудителя в организме животного, что создаёт благоприятные условия для поддержания интенсивности эпизоотического процесса.

Длительное бессимптомное течение и неспецифические симптомы заболевания затрудняют клиническую диагностику хламидиоза. Не всегда эффективны и традиционные иммунохи-мические или серологические методы анализа, т.к. хламидийная инфекция часто вызывает «неясный» иммунный ответ. Дороговизна, длительность и трудоемкость выделения возбудителя на куриных эмбрионах и в культурах клеток существенно затрудняют его использование в лабораторной диагностике, в частности в небольших ветеринарных клиниках и кабинетах.

Целью этого исследования было установить наличие циркулирующего эпизоотического процесса хламидиоза кошек.

Материалы и методы
Исследования проводили на базе ветеринарной клиники ЗАО «Айболит» г. Тюмени. В работе было использовано 117 кошек, поступивших в ветеринарную клинику с симптомами острого конъюнктивита в период с июня по октябрь 2007 года, среди всех поступивших кошек была зарегистрирована различная патология. В качестве диагностического теста использовали «Набор флуоресцирующих иммуноглобулинов и контрольных сывороток для диагностики хламидиозов», производства «ФЦТРБ-ВНИВИ» г.Казань.

Световую микроскопию производили с помощью светового микроскопа БИОЛАБ (Россия). С целью визуального обнаружения элементарных и ретикулярных телец хламидии, мазки-отпечатки с конъюнктивы глаза и тканей окрашивали по модифицированному методу Стемпа и Грамму. В качестве достоверности и подтверждения полученных результатов осуществляли постановку биологической пробы на лабораторных белых мышах.

Результаты исследований
В результате проведенных исследований по индикации хламидии в клиническом материале, полученном от 117 кошек, поступивших в клинику, в РИФ положительный результат был установлен у 36 кошек (42,1%). Параллельно с РИФ мазки-отпечатки из конъюнктивы, реагировавшие в РИФ, окрашивали по модифицированному методу Стемпа. Из 36 (42,1%) кошек, реагировавших ранее в реакции иммунофлуоресценции, при окраске по Стемпу хламидии обнаружили только у 14 (16,3%) кошек с симптомами острого конъюнктивита. Расхождения по результатам РИФ и световой микроскопии связано, скорее всего, с тем, что при световой микроскопии хламидии можно обнаружить только при их значительном количестве в клиническом материале — такое на практике бывает крайне редко.

Кроме того, положительные результаты люминесцентной микроскопии иногда могут быть обусловлены одной или несколькими причинами:
—ложноположительные результаты РИФ;
—субъективность оценки результатов РИФ;
— наличие у рептилий хламидий разных видов, которые не дают амплификацию специфичных фрагментов ДНК при использовании указанной выше тест-системы;
— погрешности при взятии и первичной обработке проб для ПНР;
— другие причины.

У остальных кошек при световой микроскопии мазков-отпечатков элементарные тельца хламидии обнаружены не были. Интересен и тот факт, что у животных, которые наблюдались в клинике с разнообразной патологией (без признаков конъюнктивита), при световой и люминесцентной микроскопии также выявлялись элементарные тельца и антиген хламидии соответственно, что может свидетельствовать об этиологической роли хламидии при различной патологии у кошек.

На основании результатов световой и люминесцентной микроскопии для подтверждения хламидийной этиологии заболеваний у кошек была проведена биопроба на белых мышах. При постановке биологической пробы в качестве первичного инфекционного материала для заражения служили смывы с конъюнктивы. Были приготовлены суспензии, которые были обработаны антибиотиками, индеферентными в отношении хламидий. Заражение белых мышей производили интраназально и в брюшную полость по общепринятой методике, всего было заражено 25 мышей. В течение 15 дней после заражения гибели лабораторных животных не наблюдали. Спустя этот срок все белые мыши были убиты. Из органов и тканей белых мышей были приготовлены мазки-отпечатки и суспензии для заражения. При световой микроскопии в мазках-отпечатках, сделанных из органов и тканей вынужденно убитых белых мышей, было обнаружено незначительное количество элементарных (окраска по модифицированному методу Стемпа) и ретикулярных телец (окраска по Грамму) хламидий.

Во втором пассаже также было использовано 25 белых мышей (интраназально и внутрибрюшинно). Гибель белых мышей во втором пассаже отмечалась на 8-10 день, при окраске мазков-отпечатков, полученных из паренхиматозных органов павших животных, были обнаружены и идентифицированы морфологические структуры хламидий.

Заключение
Таким образом, при мониторинге кошек, поступивших в ветеринарную клинику с симптомами острого конъюнктивита, вызванного хламидиозом, морфологические структуры и антиген возбудителя были обнаружены у 16,3% исследованных кошек. Все исследования подтверждены биологической пробой на белых мышах. Нашими исследованиями доказана циркуляция возбудителя хламидиоза у кошек в г.Тюмени.

Кроме того, положительные результаты люминесцентной микроскопии иногда могут быть обусловлены одной или несколькими причинами:
—ложноположительные результаты РИФ;
—субъективность оценки результатов РИФ;
— наличие у рептилий хламидий разных видов, которые не дают амплификацию специфичных фрагментов ДНК при использовании указанной выше тест-системы;
— погрешности при взятии и первичной обработке проб для ПНР;
— другие причины.

Хламидиоз у пушистых питомцев представляет инфекционное заболевание, возбудителем которого являются внутриклеточные микроорганизмы — Chlamydia. Согласно ветеринарной статистике, 5 — 10% особей кошачьей популяции болеют хламидиозом. Инфекция поражает главным образом дыхательную систему, характеризуется развитием конъюнктивита.

Нередко хламидии атакуют пищеварительную систему и органы половой сферы, опасен недуг и для человека. Одним из активных способов защиты животного от заболевания является вакцинация.

Симптомы хламидиоза

Первоначально, проникнув в организм животного, хламидии атакуют эпителиальные клетки, выстилающие слизистую оболочку конъюнктивы, ротовой полости, глотки, желудка, кишечника, мочеполовой системы и прямой кишки. Микроорганизмы нейтрализуют защиту клетки и беспрепятственно в ней размножаются. Инкубационный период составляет от 7 до 14 дней.

Ветеринарные специалисты рекомендуют обратить внимание на следующую симптоматику у питомца с целью раннего обращения за квалифицированной помощью:

В некоторых случаях хламидийная инфекция проявляется хромотой, тугоподвижностью суставов. В молодом возрасте инфекция сопровождается низкорослостью, отставанием в росте и развитии от породных стандартов.

В ветеринарной практике различают острое и хроническое проявление недуга. Острая форма характерна ярким проявлением клинической картины. Хроническое течение болезни носит латентный характер и может протекать бессимптомно для владельца.

Анализы для выявления заболевания

Диагностика заболевания включает в себя как клинические методы, так и лабораторные. В специализированном учреждении у пушистого питомца произведут забор крови и возьмут конъюнктивальные соскобы или мазки. В анализе крови обращают внимание на лейкоцитоз, характерный для инфекционного процесса.

В соскобах и мазках обнаруживают цитопластические хламидийные включения. Для диагностики применяется также иммуноферментный тест, позволяющий выявить специфические антигены в биологическом материале.

Высокоточным методом диагностики инфекции является метод полимеразной цепной реакции. Исследование позволяет обнаружить единичные копии хламидий в образцах.

Важное место занимает дифференциальная диагностика хламидиоза от других схожих по проявлениям инфекций. Ветеринарный врач исключает следующие болезни: вирусный ринотрахеит, кальцивироз, реовирусную инфекцию, бордетеллез.

Для исключения неинфекционной пневмонии животному может быть проведено рентгенологическое обследование грудной клетки.

Может ли передаться человеку

Опасна хламидийная инфекция не только для представителей кошачьего рода, но и для домочадцев. Заразиться человек может во время ухода за заболевшим и выздоравливающим питомцем при несоблюдении правил личной гигиены. Болезнь проявляется в виде конъюнктивита.

Заражение беременных женщин может привести к бесплодию. Оградить от общения с больным животным следует также маленьких детей, пожилых и больных членов семьи с ослабленным иммунитетом.

Наибольшая опасность угрожает владельцу и домочадцам при хроническом течении заболевания, когда недуг проходит в бессимптомной форме, и невозможно догадаться о наличии у животного опасной инфекции.

Вне организма домашней кошки возбудитель может существовать от 24 до 36 часов. Ультрафиолетовое облечение губительно для микроорганизма. Кипячение убивает хламидии в течение 1 минуты. В отношении дезинфицирующих средств возбудитель избирателен и уничтожается только специальными растворами (фенола, хлорамина и т.д.). Относительная устойчивость хламидий во внешней среде обуславливает их широкую распространенность среди млекопитающих, в том числе и людей.

Давайте будем совместно делать уникальный материал еще лучше, и после его прочтения, просим Вас сделать репост в удобную для Вас соц. сеть.