Как берется у кошки анализ на хламидиоз?

Хламидиоз среди мелких домашних животных — достаточно распространённое заболевание, которое наиболее часто встречается у кошек. Заболевание может протекать без проявления основных клинических признаков, в скрытой форме с достаточно длительным персистированием возбудителя в организме животного, что создаёт благоприятные условия для поддержания интенсивности эпизоотического процесса.

Длительное бессимптомное течение и неспецифические симптомы заболевания затрудняют клиническую диагностику хламидиоза. Не всегда эффективны и традиционные иммунохи-мические или серологические методы анализа, т.к. хламидийная инфекция часто вызывает «неясный» иммунный ответ. Дороговизна, длительность и трудоемкость выделения возбудителя на куриных эмбрионах и в культурах клеток существенно затрудняют его использование в лабораторной диагностике, в частности в небольших ветеринарных клиниках и кабинетах.

Целью этого исследования было установить наличие циркулирующего эпизоотического процесса хламидиоза кошек.

Материалы и методы
Исследования проводили на базе ветеринарной клиники ЗАО «Айболит» г. Тюмени. В работе было использовано 117 кошек, поступивших в ветеринарную клинику с симптомами острого конъюнктивита в период с июня по октябрь 2007 года, среди всех поступивших кошек была зарегистрирована различная патология. В качестве диагностического теста использовали «Набор флуоресцирующих иммуноглобулинов и контрольных сывороток для диагностики хламидиозов», производства «ФЦТРБ-ВНИВИ» г.Казань.

Световую микроскопию производили с помощью светового микроскопа БИОЛАБ (Россия). С целью визуального обнаружения элементарных и ретикулярных телец хламидии, мазки-отпечатки с конъюнктивы глаза и тканей окрашивали по модифицированному методу Стемпа и Грамму. В качестве достоверности и подтверждения полученных результатов осуществляли постановку биологической пробы на лабораторных белых мышах.

Результаты исследований
В результате проведенных исследований по индикации хламидии в клиническом материале, полученном от 117 кошек, поступивших в клинику, в РИФ положительный результат был установлен у 36 кошек (42,1%). Параллельно с РИФ мазки-отпечатки из конъюнктивы, реагировавшие в РИФ, окрашивали по модифицированному методу Стемпа. Из 36 (42,1%) кошек, реагировавших ранее в реакции иммунофлуоресценции, при окраске по Стемпу хламидии обнаружили только у 14 (16,3%) кошек с симптомами острого конъюнктивита. Расхождения по результатам РИФ и световой микроскопии связано, скорее всего, с тем, что при световой микроскопии хламидии можно обнаружить только при их значительном количестве в клиническом материале — такое на практике бывает крайне редко.

Кроме того, положительные результаты люминесцентной микроскопии иногда могут быть обусловлены одной или несколькими причинами:
—ложноположительные результаты РИФ;
—субъективность оценки результатов РИФ;
— наличие у рептилий хламидий разных видов, которые не дают амплификацию специфичных фрагментов ДНК при использовании указанной выше тест-системы;
— погрешности при взятии и первичной обработке проб для ПНР;
— другие причины.

У остальных кошек при световой микроскопии мазков-отпечатков элементарные тельца хламидии обнаружены не были. Интересен и тот факт, что у животных, которые наблюдались в клинике с разнообразной патологией (без признаков конъюнктивита), при световой и люминесцентной микроскопии также выявлялись элементарные тельца и антиген хламидии соответственно, что может свидетельствовать об этиологической роли хламидии при различной патологии у кошек.

На основании результатов световой и люминесцентной микроскопии для подтверждения хламидийной этиологии заболеваний у кошек была проведена биопроба на белых мышах. При постановке биологической пробы в качестве первичного инфекционного материала для заражения служили смывы с конъюнктивы. Были приготовлены суспензии, которые были обработаны антибиотиками, индеферентными в отношении хламидий. Заражение белых мышей производили интраназально и в брюшную полость по общепринятой методике, всего было заражено 25 мышей. В течение 15 дней после заражения гибели лабораторных животных не наблюдали. Спустя этот срок все белые мыши были убиты. Из органов и тканей белых мышей были приготовлены мазки-отпечатки и суспензии для заражения. При световой микроскопии в мазках-отпечатках, сделанных из органов и тканей вынужденно убитых белых мышей, было обнаружено незначительное количество элементарных (окраска по модифицированному методу Стемпа) и ретикулярных телец (окраска по Грамму) хламидий.

Во втором пассаже также было использовано 25 белых мышей (интраназально и внутрибрюшинно). Гибель белых мышей во втором пассаже отмечалась на 8-10 день, при окраске мазков-отпечатков, полученных из паренхиматозных органов павших животных, были обнаружены и идентифицированы морфологические структуры хламидий.

Заключение
Таким образом, при мониторинге кошек, поступивших в ветеринарную клинику с симптомами острого конъюнктивита, вызванного хламидиозом, морфологические структуры и антиген возбудителя были обнаружены у 16,3% исследованных кошек. Все исследования подтверждены биологической пробой на белых мышах. Нашими исследованиями доказана циркуляция возбудителя хламидиоза у кошек в г.Тюмени.

Световую микроскопию производили с помощью светового микроскопа БИОЛАБ (Россия). С целью визуального обнаружения элементарных и ретикулярных телец хламидии, мазки-отпечатки с конъюнктивы глаза и тканей окрашивали по модифицированному методу Стемпа и Грамму. В качестве достоверности и подтверждения полученных результатов осуществляли постановку биологической пробы на лабораторных белых мышах.

Развитие воспаления конъюнктивальной оболочки глаз у домашнего питомца провоцирует бактерия Chlamydophila Felis. Кошка заражается, охотясь на птиц или мышей, при контакте с калом, слюной или мочой больного грызуна или пернатого. Инфицирование другим микробом Chlamydophila psittaci, что приводит к поражению внутренних органов, происходит и через половые пути. Котенок может заразиться хламидиозом при родах или в утробе матери.

Болеют и домашние животные, хозяева которых никогда не выпускают питомцев на улицу. Возбудитель хламидиоза заносится в комнату с обувью, одеждой, сумкой владельца. Питомцы, гуляющие вместе с бродячими кошками, заражаются гораздо чаще. Хламидии имеют такую же клеточную оболочку, как и грамотрицательные бактерии, но элементарные тельца, как и у вирусов, у них состоят из одной молекулы ДНК. Эти микроорганизмы опасны для человека со слабым иммунитетом, ухаживающего за инфицированным животным.

Во внешней среде хламидии живут до полутора суток. Паразиты погибают за минуту, если попадают в кипяток. Уничтожают вредоносные микробы:

• ультрафиолетовые лучи;
• хлорамин;
• фенол.

При проникновении в организм кошки хламидии внедряются в клетки эпителия слизистых желудка, кишечника, мочевого пузыря, полости рта и глотки, в конъюнктивальную оболочку, где разрушают их защиту и начинают размножаться, что происходит в виде бинарного деления.

Внимание! Скрытый период инфицирования внутриклеточными микробами продолжается 1-2 недели.

Симптомы

На начальных этапах хламидиоз можно спутать с простудой или другой патологий, но нередко он протекает вообще бессимптомно, особенно это касается пищеварительного тракта. Признаки болезни отсутствуют, но вместе с калом и слюной у кошки выходят хламидии, которые попадают в окружающую среду.

Питомец не набирает вес, выглядит истощенным, иногда хромает, отказывается от любимого корма. Если хламидиоз приобретает хронический характер у кошки постоянно красные глаза, в уголках образуется корочки красновато-кирпичного цвета.

Острая форма патологии проявляется более выражено, клиническая картина зависит от того, какие органы поражены хламидиями.

Внимание! Игнорирование признаков поражения органов зрения приводит к воспалению роговицы или появлению катаракты, которая нередко заканчивается слепотой.

Уход за кошкой во время болезни

Любимцев, зараженных хламидиозом, изолируют от других питомцев и не выпускают на улицу.

Изменение в кормлении

Чтобы не допустить развития дисбактериоза в рацион кошки добавляют йогурты и другие кисломолочные продукты, в которых присутствуют лактобактерии. Питомцу нужно давать куриный бульон и жидкие лечебные корма, так как в них легче добавить лекарства в твердой форме, предварительно измельченными в порошок.

Личная гигиена

Помещение, где находится зараженное хламидиозом животное, необходимо обработать дезинфицирующими средствами. Нужно более тщательно следить за гигиеной больной кошки, чаще убирать лоток. Хозяину надо чистить обувь при входе в квартиру, обязательно мыть руки с мылом после контакта с питомцем.

Желательно не сильно тревожить больное животное (меньше играть с ним и не подпускать к любимцу семьи маленьких детей).

Опасность для человека

Если игнорировать гигиену при уходе за больным питомцем, домочадцы могут заразиться инфекцией, вызываемой хламидиями. Патология проявляется в виде воспаления конъюнктивы, но случается такое лишь при ослабленном иммунитете. Хламидиоз может привести к бесплодию у женщин. Поэтому необходимо не допускать никаких контактов с больными котятами беременных женщин, малышей и пожилых людей.

Опасность представляет хламидиоз, имеющий хронический характер, поскольку часто никто из членов семьи даже не подозревает, что кошка больна. Так у возбудителя есть больше времени, чтобы передаться члену семьи или другой кошке.

Важно! Возбудители хламидиоза у кошек и собак различны, поэтому кошка не может заразить хламидиями собаку.

• Нужно чаще обследовать кошек. Особенно это актуально, если питомцев привлекают к вязке и берут на выставки.
• Необходимо следить, чтобы любимец не играл с бродячими животными, не гонялся за птицами, не ловил грызунов.
• Чтобы не занести инфекцию с улицы владельцам надо тщательно мыть руки, следить за чистотой обуви.

Хламидиоз – часто встречаемая инфекция у кошек в России. Возбудитель заболевания – внутриклеточная бактерия (живет в клетках кошки). Вид хламидий, поражающий кошек – Chlamydia felis.

Симптомы

В основном хламидии поражают глаза кошек. Отмечается

• Неестественные выделения из глаз (обильно текут слезы)
• Воспаление конъюнктивы и склеры глаза (покраснение «белой» части глаза)

Вначале появляются водянистые выделения из глаз, затем конъюнктива глаза краснеет и отекает, выделения становятся более густыми.

Симптомы могут появиться на одном глазу, но чаще в процесс вовлекается оба глаза. Симптомы обычно появляются через 5 дней после заражения.

Также хламидиоз может вызывать

• Лихорадку
• Чихание
• Выделения из носа

Некоторые кошки переносят болезнь без симптомов, при этом заражая других кошек.

Что делает хламидия с кошкой?

Хламидии прикрепляются к клеткам слизистых оболочек конъюнктивы, кишечника и репродуктивных органов кошки. Глаза кошки краснеют, воспаляются и генерируют выделения.

У котят хламидиоз может вызвать пневмонию

Как передается хламидиоз кошек?

• Прямой путь заражения: контакт здоровой с больной, передача через выделения глаз или из носа. Котята могут заразиться во время рождения.
• Непрямой путь заражения: хламидии плохо сохраняются в окружающей среде, тем не менее возможно заражение при контакте с мисками для еды и питья, лежанками, лотками, руками владельца, с которыми ранее контактировала больная кошка.

Какие кошки в зоне риска?

Хламидиозом могут заболеть кошки любого возраста, тем не менее чаще страдают котята в возрасте 5 – 9 месяцев, кошки, содержащиеся в стрессовых условиях (например, в кошачьих питомниках).

Диагностика хламидиоза у кошек

Предварительный диагноз может быть поставлен на основании симптомов заболевания. Однако, нужен дифференциальный диагноз, для чего проводят анализ на хламидиоз, так как есть несколько инфекций, вызывающих похожие симптомы.
Существует несколько анализов на хламидиоз кошек, такие как ПЦР, ИФА или посев бактериальной культуры. В нашей ветеринарной лаборатории СВАО вы можете круглосуточно сдать анализы на хламидиоз кошек.

Лечение хламидиоза кошек

Для лечения хламидиоза кошкам назначают антибиотики, а также поддерживающее питание, выделения из глаз убирают с помощью теплой влажной ткани. Если у вашей кошки покраснели глаза, они начали слезиться, и вы предполагаете хламидиоз, обратитесь в ветеринарную клинику. Ветеринарная клиника Созвездие находится в СВАО, рядом с м. ВДНХ. Работаем круглосуточно.

Вакцина от хламидиоза кошек

Существуют вакцины от хламидиоза кошек. В первую очередь необходима вакцинация кошек в питомниках, а также в семьях, где живет несколько кошек или есть вероятность с другими кошками (например, кошка выходит на улицу). Существует несколько вакцин для кошек, которые включают компонент против хламидиоза, такие как французская вакцина Пуревакс RCPCh и отечественная вакцина Мультифел. Мультифел более бюджетная вакцина, Пуревакс обладает рядом преимуществ. Узнайте больше о прививках для котят и кошек в следующей статье.

Хламидиоз кошек передается человеку?

В первую очередь нужно знать, что хламидиоз кошек и хламидиоз человека вызывают две совершенно разных бактерии, предпочитающие жить в своих целевых видах.
В целом хламидиоз кошек не опасен человеку. В исключительно редких случаях возможно проявление симптомов в виде поражения глаз (кератоконьюктивиты) и пневмонии у человека, чаще у людей с серьезными проблемами иммунитета.

Хламидиозом могут заболеть кошки любого возраста, тем не менее чаще страдают котята в возрасте 5 – 9 месяцев, кошки, содержащиеся в стрессовых условиях (например, в кошачьих питомниках).

Хламидиоз у пушистых питомцев представляет инфекционное заболевание, возбудителем которого являются внутриклеточные микроорганизмы — Chlamydia. Согласно ветеринарной статистике, 5 — 10% особей кошачьей популяции болеют хламидиозом. Инфекция поражает главным образом дыхательную систему, характеризуется развитием конъюнктивита.

Нередко хламидии атакуют пищеварительную систему и органы половой сферы, опасен недуг и для человека. Одним из активных способов защиты животного от заболевания является вакцинация.

Симптомы хламидиоза

Первоначально, проникнув в организм животного, хламидии атакуют эпителиальные клетки, выстилающие слизистую оболочку конъюнктивы, ротовой полости, глотки, желудка, кишечника, мочеполовой системы и прямой кишки. Микроорганизмы нейтрализуют защиту клетки и беспрепятственно в ней размножаются. Инкубационный период составляет от 7 до 14 дней.

Ветеринарные специалисты рекомендуют обратить внимание на следующую симптоматику у питомца с целью раннего обращения за квалифицированной помощью:

В некоторых случаях хламидийная инфекция проявляется хромотой, тугоподвижностью суставов. В молодом возрасте инфекция сопровождается низкорослостью, отставанием в росте и развитии от породных стандартов.

В ветеринарной практике различают острое и хроническое проявление недуга. Острая форма характерна ярким проявлением клинической картины. Хроническое течение болезни носит латентный характер и может протекать бессимптомно для владельца.

Анализы для выявления заболевания

Диагностика заболевания включает в себя как клинические методы, так и лабораторные. В специализированном учреждении у пушистого питомца произведут забор крови и возьмут конъюнктивальные соскобы или мазки. В анализе крови обращают внимание на лейкоцитоз, характерный для инфекционного процесса.

В соскобах и мазках обнаруживают цитопластические хламидийные включения. Для диагностики применяется также иммуноферментный тест, позволяющий выявить специфические антигены в биологическом материале.

Высокоточным методом диагностики инфекции является метод полимеразной цепной реакции. Исследование позволяет обнаружить единичные копии хламидий в образцах.

Важное место занимает дифференциальная диагностика хламидиоза от других схожих по проявлениям инфекций. Ветеринарный врач исключает следующие болезни: вирусный ринотрахеит, кальцивироз, реовирусную инфекцию, бордетеллез.

Для исключения неинфекционной пневмонии животному может быть проведено рентгенологическое обследование грудной клетки.

Может ли передаться человеку

Опасна хламидийная инфекция не только для представителей кошачьего рода, но и для домочадцев. Заразиться человек может во время ухода за заболевшим и выздоравливающим питомцем при несоблюдении правил личной гигиены. Болезнь проявляется в виде конъюнктивита.

Заражение беременных женщин может привести к бесплодию. Оградить от общения с больным животным следует также маленьких детей, пожилых и больных членов семьи с ослабленным иммунитетом.

Наибольшая опасность угрожает владельцу и домочадцам при хроническом течении заболевания, когда недуг проходит в бессимптомной форме, и невозможно догадаться о наличии у животного опасной инфекции.

Заразиться хламидиозом может и абсолютно домашняя кошка, никогда не покидающая пределы квартиры. Возбудитель нередко вносится с обувью, вещами самим владельцем с улицы. При контакте домочадцев с бродячими животными риск инфицирования пушистого домоседа резко увеличивается.

Гончаров С.Б.
Ветеринарный врач

В последнее десятилетие интерес медицинских и ветеринарных специалистов многих стран мира привлекают хламидии, которые широко распространены среди различных видов животных, что обусловлено наличием неконтролируемого резервуара возбудителя инфекции в природе.[6] Хламидии способны вызвать заболевание более чем у 200 видов млекопитающих, а также у птиц и рептилий. Зараженные животные могут стать источником инфекции человека.[10, 24] Таким образом, хламидиоз является зооантропонозом, т.е. инфекционной болезнью общей для человека и животных.

Патология, вызываемая хламидиями, довольно разнообразна. У птиц встречаются респираторная, энтеральная и генерализованная формы.[15] У млекопитающих заболевания проявляются в виде энзоотических абортов, плацентитов, вагинитов и полиартритов.[3, 31] У человека эти микроорганизмы вызывают более 20 клинических синдромов, в частности, фарингиты, отиты, бронхопневмонии, миокардиты, артриты, поражение нервной системы и глаз, а также венерические гранулемы и урогенитальные поражения.[5, 6, 7, 8] Исследования, проведенные во многих странах в течение последних десяти лет, показали, что среди домашних животных – хламидиоз, в клинически выраженной форме, чаще всего встречается у кошек.[16, 17]

Возбудители болезни – Chlamydophila psittaci и Chlamydophila felis. Они относятся к одной из малоизученных групп микроорганизмов. Особенностью хламидий является способность при неблагоприятных условиях (некорректная терапия, и пр.) трансформироваться в латентные (L) формы, что сопровождается длительной персистенцией возбудителя и хроническим течением болезни. Это создаёт серьёзные трудности в диагностике и лечении заболевания, так как L-формы хламидий не чувствительны к антибиотикам и трудно диагностируются.[22] В латентной форме эти возбудители очень устойчивы к химическим и физическим воздействиям, в активной форме на них губительно действуют УФЛ, кипячение, 700C этиловый спирт и другие дезинфицирующие средства.[14, 20, 43]

Часто опасность заражения человека хламидиозом исходит от птиц, в особенности от попугаев и голубей.

Штаммы хламидий, выделенные от птиц, считаются для человека особенно патогенными. Заражение происходит аэрогенным путем за счет вдыхания пыли, содержащей во взвешенном состоянии выделения и частицы перьев птиц, инфицированных хламидиями.[15, 27, 40]

В 1980-м году были описаны 20 случаев заражения человека хламидиями от млекопитающих. Кошки заражаются почти всеми штаммами возбудителя. Птицы и мыши, на которых они охотятся, являются природным резервуаром и первичным источником инфекции. Заражение человека происходит при тесном контакте с кошкой, у которой инфекция может протекать латентно.[33]

Этиологическая роль кошачьих хламидий пока до конца не выяснена, хотя в литературе имеются примеры зооантропонозной природы этой инфекций. Так, в США двадцатилетний мужчина заболел односторонним фолликулярным конъюнктивитом после того, как у его кошки проявились симптомы поражения конъюнктивы. Как у кошки, так и у её хозяина в конъюнктивальных мазках, взятых в этих случаях, были найдены тельца-включения, типичные для хламидий. Полагают, что антиген от кошки к человеку попал через нанесенные кошачьи царапины.[2]

В соответствии с решением юридической комиссии Международной ассоциации микробиологических обществ (МАМО), с 1980г. эти микроорганизмы получили родовое название Chlamydia. До 1989г. были известны только 2 вида хламидий — C.trachomatis и C.psittaci. С 1989г. выделяют третий самостоятельный вид хламидий — C.pneumoniae, а в 1993г. японскими микробиологами описан и четвертый вид — C.pecorum (Fukushi Н., Hirai К., 1993). По новой классификации речь идет о патогенных для человека микроорганизмах Chlamydia trachomatis, серовары D-K, принадлежащих в роду Chlamidia. К этому же роду относится также вид C.muridarum, патогенный для мышей и хомячков, и вид C.suis, инфицирующий свиней.[24, 33]

Хламидии являются грамотрицательными бактериями. Они имеют сходную с бактериями клеточную стенку, их генетический аппарат представлен нуклеиновыми кислотами – ДНК и РНК, чувствительны к антибиотикам, что сближает их с грамотрицательными бактериями.[32] Однако они не способны размножаться на искусственных питательных средах, и для репродукции им нужна живая чувствительная клетка как внутриклеточным микроорганизмам, что роднит их с вирусами.[41]

Хламидии обладают способностью блокировать механизмы иммунной защиты хозяина путем предотвращение слияния фагосомы с лизосомами.

Благодаря этому клетки хозяина не только предохраняют инфект, но и способствуют их росту. Для размножения и роста внутриклеточные патогены используют питательные вещества и продукты жизнедеятельности клетки-хозяина. В процессе своего размножения хламидии разрушают цитоплазматические включения, выходят из клетки-хозяина во внешнюю среду и заражают новые клетки.[12]

Патогенез хламидийной инфекций может быть представлен в виде следую­щей схемы: хламидии являются внутриклеточными облигатными паразитами, обладают высоким политропизмом. Проникнув в организм аэрогенным, али­ментарным или половым путем, возбудитель первично размножа­ется в эпите­лиальных клетках слизистых оболочек и макрофагах. Затем внед­ряется в кровь и заносится практически во все внутренние органы, лимфатические узлы, сус­тавы и даже в головной и спиной мозг.[30]

Естественный цикл развития хламидий проходит в цитоплазматических включениях живых клеток (элементарное тельце ® ретикулярное тельце ® ретикулярные тельца ® промежуточные тельца ® элементарные тельца) и продолжается от двух до трех суток. Элементарные тельца ответственны за процесс прикрепления к клетке-мишени и проникновения в нее. Они устойчивы к факторам окружающей среды. Мелкие и оптически плотные элементарные тельца имеют ригидную клеточную стенку, жесткость структуры которой обеспечивается плотными дисульфидными связями основного белка наружной мембраны и двумя богатыми цистеином белками: белком оболочки и липопротеином наружной мембраны. Ретикулярные тельца – это большие, метаболически активные формы, синтезирующие ДНК, РНК и белки. Ретикулярные тельца являются высоко лабильными формами, которые не способны выжить вне клетки-хозяина.[42]

Хламидии проявляют выраженную чувствительность к действию коротковолновых и длинноволновых ультрафиолетовых лучей и высокой температуры. Элементарные тельца теряют свою инфекционность в 24-36 часов при 370С. Концентрированная суспензия хламидий инактивируется в течение 1 мин.

при 95-1000С, через 10-15 мин. при 700С, через 30 мин. при 500С.

Установлена возможность сохранения инфекционности материала на хлопчатобумажных тканях до 2 суток при 18-190С.

Хламидии на стадии ретикулярных телец высокочувствительны к действию 70% этанола, 2% раствор лизола, 0,05% раствора нитрата серебра, 0,1% раствора йодида калия, 0,1% раствора перманганата калия, перекиси водорода, этилового эфира и инактивируются при комнатной температуре в течение 2 суток.[35]

Активная форма хламидиоза кошек – высококонтагиозная полисимтоматическая болезнь, проявляющаяся, чаще всего, об­щей слабостью, скованностью движений, повы­шен­ной температурой тела, конъюнктивитом, ринитом, отдышкой, гастритом, эндометритом, вагинитом. Реже встречаются поражения других органов и систем. При урогенитальной локализации хламидии вызывают аборты, мертворождения и бесплодие. Хламидиоз наи­более часто поражает котят в возрасте от 5-ти недель до 9-ти месяцев. Взрослые животные также могут заражаться, поскольку естест­венный иммунитет не продолжителен, имеет не высокую напряженность. Велика вероятность повторного заражения, так как гуморальные антитела, циркулирую­щие в крови, не могут защитить организм от реинфекции.[16]

Инкубационный период длится от 5 до 10 дней. В начале забо­левания обычно отмечают легкую лихорадку, длящуюся несколько дней. Заболевшие кошки обычно продолжают принимать корм и, как правило, чувствуют себя хорошо, проявляя лишь конъюнктивальный дискомфорт. Конъюнктивит начинается в большинстве случаев унилатерально (односторонне), выделение из глаза – сероз­ные. Через 10 – 17 дней поражается второй глаз. Конъюнктивит может продол­жаться от нескольких дней до нескольких месяцев, а иногда принимает хрони­ческое течение. По мере развития болезни конъюнктива становится более гипе­ремированной, а выделения – слизисто-гной­ными вследствие вторичной бакте­риальной инфекции.[38]

Поражение дыхательных путей часто проходит бессимптомно или со слабо выраженными признаками. Поэтому диагностировать хламидиозную пневмонию можно только гистологическими методами. Очаги поражения легочной ткани в виде мелких ограниченных гиперемированных участков со слабой аэрацией, располагаются преимущественно в периферических участках легкого рядом с бронхиолами.

Нарушение репродуктивной функции у кошек, включая аборты, отмечались довольно часто в кошачьих питомниках, где наблюдается эндемическое тече­ние болезни.

Внедрение хламидий в мочеполовой тракт редко сопровождается заметными клиническими проявлениями. Заболевание чаще бывает асимптомным или скрытым.

Диагностика хламидиоза кошек затруднена, поскольку многие клинические признаки присущи другим заболеваниям – калицивирусной и реовирусной инфекциям.[17]

Ни один из современных методов диагностики внутриклеточных патогенов не обеспечивает выявление возбудителя в 100% случаев. Поэтому лабораторная диагностика хламидий должна включать в себя сочетание не менее двух методов (прямых или непрямых).[23]

1. Методы прямого выявления бактерий:

· Микробиологическое исследование – выделение чистой культуры возбудителя;
· Цитологическое исследование мазков, окрашенных по методу Романовского-Гимза;
· Иммунологическое исследование – выявление антигенов возбудителя в мазках с помощью специфических антител (реакция прямой иммунофлуоресценции – РИФ), ДНК-зонды;
· Молекулярно-биологические методы – определение специфического участка ДНК/РНК в геноме возбудителя (полимеразная цепная реакция – ПЦР, лигазная цепная реакция – ЛЦР);
· Серологическое исследование – определение бактериальных антигенов (иммуноферментный анализ – ИФА);
· Методы экспресс-диагностики хламидий (иммунохроматография и ферментспецифическая реакция).

2. Непрямой метод, косвенно указывающий на наличие возбудителя у пациента:

· Серологическое исследование – определение специфических антител, образовавшихся в процессе иммунного ответа на микроорганизм (реакция связывание комплемента – РСК, реакция непрямой иммунофлуоресценции – РНИФ, иммуноферментный анализ – ИФА, реакция микроиммунофлуоресцинции – МИФ, рекомбинантный липополисахаридный ИФА – r-ELISA).[1, 18]

Методы прямого выявления хламидий.

Наиболее чувствительным, но трудоемким методом лабораторной диагностики является микробиологическое исследование.

Для размножения in vitro хламидий необходимы клеточные линии млекопитающих. Для этой цели используют культуру клеток McCoy представляющую собой гибридные клеточные линии из человеческих синовиальных клеток и мышиных фибробластов, а также клетки Hela – перманентную клеточную линию из человеческой карциномы и L-299 – культуру клеток мышиных фибробластов.

Для C. psittaci наиболее эффективно применяют перманентную клеточную линию из почек африканской зеленой мартышки (BGM), в то время как для C. trachomatis клетки McCoy.

Критерием диагностического выделения хламидий служит выявление в инфицированных клетках типичных цитоплазматических включений в окрашенных препаратах при первичном заражении или в серии из 1-2 пассажей при отсутствии бактериальной контаминации.

При микробиологическом методе исследования возможно получение ложно-негативных результатов. Это происходит вследствие гибели возбудителя при нарушении правил забора биологического материала или во время его транспортировки в микробиологическую лабораторию.

Цитологический метод – метод непосредственной микроскопии — патологического материала (сос­коб с пораженной слизистой оболочки) был основным способом обнаруже­ния хламидий. При этом использовали окраску препаратов по Стемпу, Мак­киавелло и Романовскому-Гимзе. Окраска по Стемпу придает элементарным тельцам хламидии красно-фиолетовый цвет на синем фоне препарата; по Маккиавелло хламидии окрашиваются в ярко-красный цвет, клетки патоло­гического материала – в светло-синий, ядра клеток – в темно-синий цвет; по Романовскому-Гимзе элементарные включения хламидии приобретают красно- фиолетовый цвет, а ретикулярные тельца пораженной клетки – си­ний, ядро клеток – бордово-фиолетовый и их цитоплазма – голубой. Окра­шенные мазки исследуют с иммерсионной системой. Клеточные включения при микроскопии находят в виде скопления в цитоплазме вокруг ядра пора­женной клетки и образующих компактные включения в форме “ шапочки жандарма”.

Включения могут располагаться в цитоплазме клетки диффузно. Цитологический метод в последнее время практически не используется, в связи с низкой чувствительностью – диагностировать хламидийную инфекцию у больных животных удается лишь в 10-12% случаев.[18]

Одним из самых распространенных методов диагностики является метод иммунофлуоресценции, позволяющие выявить цитоплазматические включения хламидий с содержащимися в них антигенами.

Прямой метод иммунофлуоресценции основан на выявлении хламидийных антигенов в клинических образцах от животных с помощью лиофилизированных моноклональных антихламидийных иммуноглобулинов, меченных флуоресцин-изотиоционатом (ФИТЦ), с синькой Эванса и азидом натрия.

Высокая специфичность моноклональных антител позволяет диагностировать наличие элементарных телец хламидий, расположенных внеклеточно и представляющих собой ярко-зеленые образования с ровными краями округлой формы. Размеры их составляют 1/100 от окружающих эпителиальных клеток.

В непрямом методе предусматривается непрямое окрашивания антигена, который соединяется на первом этапе реакции с немеченой антисывороткой животного, заведомо содержащей хламидийные антитела, а на втором этапе проводится окрашивание образовавшегося комплекса антиген-антитело за счет добавления меченной (антивидовой) сывороткой, содержащей конъюгированные с ФИТЦ антитела к глобулинам (антигенам) сыворотки, использовавшейся на первом этапе.

Получение ложно-негативных материалов может быть связано с нарушении правил забора биологического материала (отсутствие эпителиальных клеток в мазке). Ложно-позитивные результаты являются следствием неспецифического связывания антител с неинфекционным биоматериалом.

Метод полимеразной цепной реакций (polimerase chain reaction, PCR, ПЦР) или реакция энзиматической амплификаций, предложенная Кэри Б. Мюллисом (1983), стремительно вошел в практику и работу ученых, ведущих исследования в области биологии и медицины.

ПЦР широко применяется для диагностики и типирования возбудителей хламидиозов, что связано со сложностью их культивирования.[19]

а) Быстрота анализа. Все процедуры ПЦР занимают 1-2 рабочих дня при параллельной обработки 10-12 образцов;
б) Надежность;
в) Чувствительность;
г) Специфичность;
д) Для ПЦР пригоден любой материал, даже гистопрепараты.

а) термостабильный фермент ДНК-полимера;
б) пара олигонуклеотидных праймеров;
в) четыре типа дезоксинуклеозидтрифосфатов;
г) копируемая ДНК;
д) ионы Mg2+ необходимые для функционирования ДНК-полимеразы;
е) буферные растворы для поддержания рН во время ПЦР между 6,8 – 7,8 и минеральное масло для предотвращение испарения.

Амплификатор – это прибор для проведения реакции в автоматическом режиме, обеспечивающем поддержку в реакционной смеси заданной температуры в течение заданного времени.

Технология идентификации ДНК-содержащих вирусов заключается в следующем:

1) Из исследуемого материала выделяется ДНК-матрица
2) В пробирке смешивают ДНК, праймеры, дезоксирибонуклеотидтрифосфаты, буфер и ДНК-полимеразу
3) Пробирку со смесью нагревают до температуры денатурации ДНК (940С), при этом две цепи ДНК расходятся
4) Затем пробу инкубируют при температуре гибридизации праймеров с ДНК-матрицей (40-600С) в последующем
5) ДНК-полимераза осуществляет комплементарное достраивание нитей ДНК-матрицы с помощью дезоксирибонуклеозидтрифосфатов (720С). В результате проведенного цикла происходит удвоение искомого генетического материала
6) В последующем цикле синтез осуществляется с 4 копий, далее с 8 и т. д., до 20-30 циклов. В результате получают миллионы копий специфического участка ДНК вируса, бактерий или клеток крови.

Индикация амплифицированного генетического материала проводится выше изложенным способом. В ПЦР любая из вновь синтезированных цепей ДНК служит матрицей для синтеза молекул ДНК, соответствующих по длине и последовательности участку ДНК, выбранному для амплификации.[34]

Подготовка пробы материала (выделение ДНК и РНК) должна проводиться в условиях, исключающих перекрестное загрязнение исследуемых проб выделяемыми нуклеиновыми кислотами.

Для этого необходимо использовать чистые перчатки, одноразовые пробирки и наконечники к автоматическим пипеткам, УФЛ и 700C спирт для обработки помещений и рабочих поверхностей столов и приборов.[13]

Несмотря на растущую популярность метода ПЦР он также, как и ПИФ небезупречен, поскольку при использовании высокочувствительной и специфичной ПЦР не исключены ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Если C. psittaci обнаружена методом ПЦР, то можно ограничится только этим исследованием. Мнение, что ПЦР даже при соблюдении всех технологических требований дает ложноположительные результаты вследствие контаминации в лаборатории, не подтверждается практикой, хотя были случаи, когда ПЦР давала положительный результат, а ПИФ – отрицательный. Именно такие случаи относятся к ситуациям так называемого «субъективного характера учета результатов», полученных методом иммунофлуоресценции.

Для обнаружения в исследуемом материале хламидий можно применить иммуноэнзимный метод (ELISA). При этом используют антитела, конъюги­рован­ные с ферментом (пероксидаза хрена, щелочная фосфатаза и др.). При наличии в исследуемом материале хламидий, то есть положительная реакция антиген-антитело, высвобождается фермент, который действует на специально вводи­мый в реагирующую смесь субстрат. Образуется цветное соединение и по интенсивности цвета, определяемого с помощью спектрофотометра, судят о ко­ли­честве и наличии антигена в забранном материале (мазке, соскобе). Иммуно­энзимный анализ, как и реакция прямой иммунофлуоресценции, может дать положите­льный результат при наличии в забранном материале нежизнеспо­собных хла­ми­дий, а также других бактерий, имеющих перекрестно реаги­рующие антигены (некоторые грамотрицательные бактерии, риккетсии Провачека и др.). Ложно-негативные результаты являются следствием низкой концентрации антигена в исследуемых образцах. Причиной ложно-позитивных результатов может быть неспецифическое связывание антител с неинфекционным биоматериалом.[18, 34]

Методы непрямого выявления хламидий.

Эта группа методов позволяет избежать ложноотрицательных результатов при прямых методах и позволяет в ряде случаев определить стадию и характер течения заболевания. Это особенно важно при персистирующей инфекции, которая поддерживает хроническое течение на протяжении многих месяцев, повреждая и разрушая ткани и органы. Методы непрямого выявления бактерий особенно хороши, если возникают трудности при взятии материала для обнаружения антител.

В основе всех этих методов лежит выявление специфических антител, которые накапливаются в сыворотке крови и секретах инфицированного организма, в процессе иммунного ответа на внедрение возбудителя инфекционного заболевания. Антитела относятся к трем классам иммуноглобулинов: M, G и A. Накопление антител каждого из этих классов происходит через разные промежутки времени от начала иммунного ответа и зависит от характера инфицирования (первичное или повторное) [1, 6].

Регистрацию специфических антител можно проводить одним из иммунохимических методов. Наиболее эффективным являются методы микроиммунофлуоресцинции и рекомбинантного липополисахаридного ИФА, которые не требуют большого количества биологического материала и позволяют достаточно точно определить к какому классу относятся антитела. С помощью этих методов удается установить серологические критерии и стадии заболеваний.

Отрицательный результат серологического исследования не позволяет однозначно исключить хламидиоз, так как кроме серопозитивных встречаются и серонегативные формы этой инфекции. Выявление в крови только IgG к C. psittaci даже в высоком титре при отсутствии маркеров самого возбудителя в урогенитальном тракте не является основанием для установления диагноза. И наоборот, обнаружение IgA к C. psittaci – основание для постановки диагноза хламидиоза. Принципиального значения величина титра этих антител (IgA) и наличие или отсутствие маркеров самих хламидий в урогенитальном тракте не имеет.[18,19,39]

Цитологический метод – метод непосредственной микроскопии — патологического материала (сос­коб с пораженной слизистой оболочки) был основным способом обнаруже­ния хламидий. При этом использовали окраску препаратов по Стемпу, Мак­киавелло и Романовскому-Гимзе. Окраска по Стемпу придает элементарным тельцам хламидии красно-фиолетовый цвет на синем фоне препарата; по Маккиавелло хламидии окрашиваются в ярко-красный цвет, клетки патоло­гического материала – в светло-синий, ядра клеток – в темно-синий цвет; по Романовскому-Гимзе элементарные включения хламидии приобретают красно- фиолетовый цвет, а ретикулярные тельца пораженной клетки – си­ний, ядро клеток – бордово-фиолетовый и их цитоплазма – голубой. Окра­шенные мазки исследуют с иммерсионной системой. Клеточные включения при микроскопии находят в виде скопления в цитоплазме вокруг ядра пора­женной клетки и образующих компактные включения в форме “ шапочки жандарма”.

Хламидиоз у кошек – это распространенное высокозаразное инфекционное заболевание. У патологии есть второе наименование – кошачий хламидийный конъюнктивит. У заразившихся животных проявляются внешние признаки респираторных заболеваний. Инфекция поражает глаза, верхние дыхательные пути (нос, горло), может распространиться на легкие, ЖКТ и половую систему.

Как узнать о заражении кошки этой инфекцией? Чем опасен хламидиоз для кошек? Какие существуют методы диагностики, способы лечения и меры профилактики?

Может ли хламидиоз передаваться от кошки человеку? Ответы на все эти вопросы ищите в нашей статье.

Острая форма заболевания характеризуется непродолжительным (1-2 дня) повышением температуры тела животного. Чуть позже у кошки появляются респираторные признаки: покраснение конъюнктивы, выделения из глаз, кашель и насморк.

Если к хламидиозу присоединится бактериальная инфекция, глаза начинают гноиться, на них образуются корочки. Обычно болезнь прогрессирует постепенно: сначала появляются выделения из одного глаза, через 2-3 недели – из второго. Без лечения острая форма перерастает в хроническую.

Для хронической формы хламидиоза характерно частое повторение кашля и насморка, длительная слезоточивость. Чтобы вовремя выявить опасную заразную болезнь, не лечите простуду самостоятельно, покажите кошку ветеринару.

Способы заражения хламидиозом

Домашние кошки могут заразиться хламидиозом несколькими способами:

• котята от больной матери;
• домашние кошки от бездомных животных;
• во время охоты на птиц и грызунов;
• контакт с калом и мочой больного животного;
• через предметы ухода (ошейники, поводки, подстилки, миски);
• через обувь, одежду и руки человека, имевшего контакт с зараженной кошкой.

• кошки в приютах и питомниках;
• на приеме у ветеринара;
• во время прогулки и поездки общественным транспортом;
• от других зараженных домашних питомцев.

Во внешней среде хламидии живут до полутора суток. Уничтожают микроскопических паразитов:

• кипяток (за 1 минуту);
• перекись водорода;
• фенол;
• хлорамин;
• гидрохлорид натрия;
• этанол (70%);
• ультрафиолетовое (солнечное) излучение.

Симптомы хламидиоза у кошек

На начальных стадиях заболевание протекает бессимптомно. Первые признаки появляются через 1-2 недели после заражения. Основные симптомы кошачьего хламидиоза следующие: При поражении органов зрения:

• покраснение и отечность слизистой глаз (может быть поражен один глаз или сразу оба);
• появление так называемого «третьего века» на глазу, в норме, когда у кошки открыты глаза его не видно;
• выделения из глаз – сначала водянистые, а потом зеленоватого или желтого цвета;
• светобоязнь;
• постоянно закрытые глаза у кошки.

При поражении дыхательных путей:

• выделение слизи из носа;
• чихание;
• кашель;
• одышка;
• хриплое дыхание;
• повышение температуры тела;
• вялость, апатия и потеря аппетита – эти симптомы чаще всего проявляются у котят.

При поражении половых органов:

• густые истечения из вульвы;
• учащенное мочеиспускание;
• рождение мертворожденного приплода.

Важно! Желудочно-кишечная форма заболевания протекает абсолютно бессимптомно. Кошка без клинических признаков является заразной и выделяет хламидии во внешнюю среду с мочой и калом.

Хламидии из-за отсутствия у них собственного энергетического обмена обычно проникают и паразитируют в клетках иммунной системы (макрофагах) или эпителиальных тканях своего хозяина. Любимой их средой обитания являются клетки слизистой оболочки конъюнктивы, глотки, желудка, тонкого кишечника, прямой кишки, уретры. Проникая в них, патогенные микроорганизмы выводят из строя клеточный защитный механизм, создавая для себя благоприятные условия для жизнедеятельности.

Давайте будем совместно делать уникальный материал еще лучше, и после его прочтения, просим Вас сделать репост в удобную для Вас соц. сеть.