III-яя глава: Режим, применяемый к почетным консульским должностным лицам и консульским учреждениям, возглавляемым такими должностными лицами.
Биологическая обусловленность онтогенеза поведения животных
Биологическая ограниченность интеллекта животных
Биологическое загрязнение окружающей человека среды. Карантинные виды растений и животных. Нежелательные интродуценты.
БОЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
В чем сходство и различие психики животных и человека?
Вид, его признаки. Многообразие видов. Редкие и исчезающие виды растений и животных, меры их сохранения. Назовите известные вам редкие и исчезающие виды растений.
Влажность в наземно-воздушной среде. Адаптации растений и животных.
Вторая глава
Высшие формы игровой исследовательской деятельности животных
Микозы — это заболевания домашних, диких животных и птиц, которые вызываются микроскопическими грибами. От больных животных часто заражается человек, поэтому многие микозы следует отнести к зооантропонозам.
Большинство возбудителей грибковых инфекций принадлежат к условно-патогенным микроорганизмам (например, грибы канди* да, актиномицеты, нокардии). Нередко микозы осложняют основное соматическое заболевание.
Все микозы условно можно разделить на две группы: поверхностные и глубокие. При поверхностных поражаются кожа и ее придатки (волосы, когти, у птиц перья), а при глубоких— внутренние органы. Отметим, что это деление относительно, так как возбудители поверхностных заболеваний при определенных условиях, проникая во внутренние органы, вызывают болезнь.
Трихофития, микроспория и фавус.Эти болезни входят в группу поверхностных микозов. Трихофитии (стригущем лишае)
более подвержены крупный рогатый скот, особенно телята, а также овцы и лошади. На коже появляются воспалительные очаги с шелушащейся поверхностью; волосы становятся тусклыми, ломкими, обламываются, образуются участки облысения.
Микроспорией нередко болеют кошки, собаки, пушные звери, а также лошади и мышевидные грызуны. На коже морды, на шее, у основания хвоста образуются очаги облысения; нередко поражаются усы, брови; волосы обламываются.
Ф а в у с (парша) регистрируется чаще среди птиц: кур, индеек, уток. На гребне, сережках образуются скутулы. У основания перьев появляется белый чехол, под которым кожа атрофируется, сальные и потовые железы разрушаются, перья выпадают.
Лабораторная диагностика. Заключается в микроскопии патматериала и его посевах на питательные среды.
Обычно исследуют соскоб кожных чещуек из очага поражения и волосы, которые выдергивают пинцетом. Волосы ножницами режут на кусочки 1. 2 мм, чешуйки с помощью иглы помещают на 20 мин в каплю 20%-го КОН для просветления материала. Затем их переносят на предметное стекло, добавляют каплю глицерина, покрывают предметным стеклом и микроскопируют под сухой системой микроскопа (объектив х40).
На препарате отыскивают элементы гриба: споры и мицелий. Споры могут располагаться на поверхности волоса, образуя подобие чехла (экзотрикс) или внутри его (эндотрикс); иногда наблюдается смешанный тип. Мицелий представлен нитями, которые нередко ветвятся. Обнаружение элементов гриба достаточно для подтверждения диагноза «микоз».
Для более точной диагностики прибегают к выделению чистой культуры гриба путем посева на специальные среды. Чаще используют среду Сабуро и сусло-агар. Ввиду того что исследуемый материал обычно контаминирован посторонней флорой, перед посевом к расплавленному агару добавляют антибиотики: пенициллин, стрептомицин (200 ЕД/мл) или левомицетин. В пробирки со скошенной средой помещают маленькие кусочки волос или чешуек на поверхность скоса. Выращивание производят при 26 °С в течение 21 сут. Обычно выделение чистой культуры осуществляют в микологической лаборатории.
Для точной идентификации выделенной культуры учитывают: характер мицелия; наличие воздушного и субстратного мицелия и его окраску; наличие конидий и хламидоспор; присутствие арт-роспор.
Наиболее часто трихофитию вызывают Т. faviforme, T. equinum, Т. mentographites, микроспорию — М. canis и М. gypseum; фавус — Achorion gallinae.
Кандидоз.Кандидозом чаще поражается молодняк сельскохозяйственных животных и домашняя птица при неправильном
кормлении, авитаминозах, дисбактериозе и бессистемном длительном лечении антибиотиками, особенно широкого спектра действия.
На слизистой полости рта, языка, половых органов появляются плотные наложения молочно-белого цвета, тесно спаянные с подлежащей тканью. При попытке снять эту пленку пинцетом может возникнуть кровотечение. Дальнейшее развитие процесса приводит к поражению кишечника, легких, почек и других внутренних органов и гибели животных.
Возбудителями служат дрожжеподобные грибы кандида: крупные клетки округлой или яйцевидной формы, размножающиеся почкованием.
Лабораторная диагностика. Заключается в микроскопическом исследовании пленчатых наложений со слизистых оболочек, фекалий, мочи, а в случае гибели животных — внутренних органов.
При микроскопии обнаруживают почкующиеся округлые клетки — бластоспоры, диаметром примерно 5 мкм, а также нити псевдомицелия. Для подтверждения диагноза следует обращать внимание на количество обнаруженных клеток, так как кандида являются представителями нормальной микрофлоры и обычно присутствуют на слизистых и кожных покровах. Лишь резкое увеличение их числа в исследуемом материале от животных указывает на кандидоз. Наиболее частым возбудителем является Candida albicans, хотя другие виды также могут быть причиной заболевания (С. krusei, С. tropicalis и др.).
Точное определение вида осуществляют в микологической лаборатории на основании следующих признаков: наличие хламидоспор, тип филаментации, сахаролитические свойства.
Плесневые микозы (аспергиллез, пенициллез, мукоромикоз).В клинических проявлениях этой группы микотических заболеваний, а также в патогенезе есть много общего, поэтому их следует рассматривать вместе.
Аспергиллезом преимущественно болеет домашняя птица при аэрогенном инфицировании в результате антисанитарных условий содержания, использования заплесневелого корма, подстилки и др. Поражаются воздухоносные пути, появляется кашель, из клюва и носа выделяется серозная жидкость. При вскрытии в легочной ткани и других органах обнаруживают множество узелков серовато-желтого цвета.
Кроме птиц аспергиллезом болеет крупный и мелкий рогатый скот, обычно ослабленный в результате длительной сопутствующей инфекции, иммунодефицита.
Пенициллезом также болеют ослабленные животные с легочной патологией, но иногда могут регистрироваться и кожные проявления.
Мукоромикозом животные инфицируются нередко аэрогенно, а также в результате травматических повреждений кожных и слизистых покровов.
Лабораторная диагностика. Лабораторная диагностика плесневых микозов заключается в микроскопии патмате-риала. Чаще всего это секционный материал, так как прижизненно точный диагноз ставят редко. При микроскопии обнаруживают широкий ветвящийся мицелий (септированный или несептиро-ванный), конидиеносцы с конидиями, нередко спорангии со спорами (при мукоромикозе). Точную идентификацию грибов проводят в микологической лаборатории.
Наиболее частыми этиологическими агентами при аспергилле-зе являются A. fumigatus, A.flavus, A. niger, при пенициллезе — P. glaucum, при мукоромикозе — М. corymbifera, M. racemosus.
Актиномикоз, нокардиоз, актинобациллез.Актиномикоз, по-видимому, самый распространенный глубокий микоз сельскохозяйственных животных в РФ. Болеют основные виды сельскохозяйственных животных: крупный рогатый скот, свиньи, лошади. Актиномикоз протекает длительно, начинаясь с очагов уплотнения в области головы, нижней челюсти, шеи, которые затем размягчаются, образуя свищи с гнойным отделяемым. В гное можно обнаружить мелкие желтоватые зерна размером с просяное зерно — друзы.
Для этой болезни характерно поражение костей (крупный рогатый скот), а у свиней — миндалин и молочной железы. Часто в процесс вовлекаются легкие.
Актиномицеты, по современным воззрениям, стоят ближе к бактериям, чем к грибам, поэтому иногда болезни, которые вызывают актиномицеты, называют псевдомикозами. Возбудителями болезни животных является Actinomyces bovis, а человека — А. Israeli.
Нокардиоз — болезнь крупного и мелкого рогатого скота, при которой в первую очередь в гнойный процесс вовлекаются лимфатические узлы и сосуды, а также легкие, центральная нервная система и вымя. Лимфатические узлы различной локализации размягчаются, из них выделяется гной. Очень тяжелые формы нокардиоза — легочная (трудно отличить от туберкулеза) и менин-гиальная. Наиболее часто нокардиоз вызывает Nocardia asteroids — аэробный проактиномицет.
Актинобациллез (псевдоактиномикоз) — хроническая болезнь, для которой характерно поражение мягких тканей головы и шеи. В отличие от актиномикоза кости в процесс не вовлекаются. Болеют крупный и мелкий рогатый скот, свиньи.
При актинобациллезе образуются абсцессы в области головы, поражаются язык, подкожная ткань, молочная железа. Характерно системное воспаление лимфатических узлов. В гное истинные
друзы не встречаются, хотя иногда имеются хлопья. Возбудитель — В. ligniersi.
Лабораторная диагностика. Подтверждением диагноза актиномикоза главным служит обнаружение друз в гное при микроскопии. Друзы — довольно крупные образования из тонких переплетенных нитей актиномицета в центре, а на периферии видны колбовидные утолщения. Если друзу раздавить между двумя предметными стеклами и окрасить по Граму, то центр окрашивается в фиолетовый цвет, а периферическая часть («дубинки») — в розовый.
Actinomyces bovis — анаэроб, требовательный к питательным средам. Друзы высевают на сердечно-мозговой, кровяной или сывороточный агар. Через 10. 14сут выращивания при 37 °С в глубине столбика среды появляются белые колонии диаметром 2. 3 мм, состоящие из грамположительных тонких нитей.
Главный признак, дифференцирующий нокардиоз и актиномикоз, состоит в том, что при нокардиозе в патматериале никогда не встречаются друзы. Труднее отличить тонкий кислотоустойчивый мицелий нокардий от туберкулезной палочки, особенно когда нити мицелия распадаются на бациллярные элементы.
Нокардий образуют на среде Сабуро или МПА при 37 °С гладкие или складчатые колонии мягкой консистенции. Иногда наблюдается пигментообразование. При микроскопии патматериала в окрашенных мазках видны тонкие грамположительные нити мицелия и отдельные бациллярные элементы.
В окрашенных мазках из гноя при актинобациллезе видны грам-отрицательные палочки и нитевидные формы. Возбудитель растет при 37 °С в аэробных условиях на богатых питательных средах.
Дата добавления: 2020-02-10 ; просмотров: 36 ; Нарушение авторских прав
Кроме птиц аспергиллезом болеет крупный и мелкий рогатый скот, обычно ослабленный в результате длительной сопутствующей инфекции, иммунодефицита.
Микозы Животных
Микозы (от греч. mykes — гриб), заболевания человека и животных, вызываемые грибами патогенными. Из микозов животных в СССР встречаются дерматомикозы (трихофития) крупного рогатого скота, лошадей, собак, кошек и пушных зверей, аспергиллёз птиц и пчёл, кандидамикоз птиц, актиномикоз крупного рогатого скота, мускардина шелкопряда, сапролегниозы и бранхиомикоз рыб. Ранее широко распространённый эпизоотический лимфангит лошадей не регистрируется. Описанные за рубежом микозы — кокцидиоидомикоз, гистоплазмоз, криптококкоз крупного рогатого скота, риноспоридиоз и споротрихоз лошадей и мулов — в СССР не регистрируются.
Возбудители микоза относятся преимущественно к классу Deuteromycetes и актиномицетам. Проникая через раны, грибы вызывают поверхностные микозы (болезни кожи и её производных); при аэрогенном или алиментарном заражении поражаются внутренние органы (висцеральный микоз). Источники заражения микоза — больные животные; факторы передачи — подстилка, выгульные площадки, места выпаса, объекты, содержащие споры возбудителей. Степень проявления микоза зависит от патогенности гриба и устойчивости макроорганизма, обусловленной воздействием факторов внешней среды. Для большинства микозов характерно хроническое течение. Диагноз ставят на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных и результатов лабораторного исследования (микроскопическое обнаружение возбудителя в поражённых тканях и выделение его в чистую культуру). При выявлении эпизоотического лимфангита и гистоплазмоза применяют также аллергический метод диагностики, при микроспории кошек и собак — люминесцентный метод.
Для лечения животных используют главным образом противогрибные антибиотики (гризеофульвин, нистатин, амфотерицин B), фунгицидные средства.
Профилактика микозов включает соблюдение ветеринарно-санитарных условий содержания животных, обеспечение их полноценным кормлением, при трихофитии крупного рогатого скота и лошадей — применение специфических средств — вакцин.
Для лечения животных используют главным образом противогрибные антибиотики (гризеофульвин, нистатин, амфотерицин B), фунгицидные средства.
Микозы и микотоксикозы у животных
Микозы — группа болезней, вызываемых патогенными микроскопическими грибами, активно паразитирующими в организме животного. К микозам относят и дерматофитозы — заразные заболевания кожи, характеризующиеся образованием на коже округлых шелушащихся, покрытых корками пятен с обломанными волосами.
К возбудителям дерматофитозов относят микроскопические грибы родов Microsporum и Trichophyton.
Источник возбудителей — больное животное. Факторы передачи возбудителя инфекции — контаминированные предметы ухода за животными, подстилка, навоз, переносчиками могут быть эктопаразиты. Заражение происходит контактным способом. Случаи заболевания наиболее часты осенью и зимой. Считается, что в 85 % случаев заболевания людей микроспорией связаны с заражением от кошек.
Различают следующие формы трихофитии: поверхностную, глубокую (фолликулярную), стертую (атипичную). Микроспория протекает преимущественно в поверхностной и стертой формах.
Диагноз устанавливается комплексно. Лабораторные исследования включают люминесцентное исследование и микроскопию патологического материала (соскоба кожи), выделение культуры возбудителя, его идентификацию.
С лечебной целью применяют противотрихофитийные вакцины для каждого вида животных. В настоящее время существуют следующие вакцины против трихофитии животных:
ТФ-130, ЛТФ-130, ТФ-130К для крупного рогатого скота;
СП-1 для лошадей; ментавак для пушных зверей и кроликов;
триховис для овец;
ателвак-ТС для верблюдов;
миколам, поливак-ТМ, вакдерм для собак, кошек, пушных зверей.
Лечение микроспории: используют 5— 10% -ную салициловую мазь, 10%-ный салициловый спирт, 10%-ный спиртовой раствор йода, 3— 10%-ные растворы карболовой и бензойной кислот, мази «Ям», Ваганова и др.
К микозам относят также аспергиллез (возбудитель — грибы из рода Aspergillus), мукоромикоз (возбудитель из рода Мисог), кокцидиоидомикоз (Coccidioidesimmi), кандидамикоз (возбудитель из рода Candida — дрожжеподобный гриб), пеницеллез (возбудитель из рода Penicillium), эпизоотический лимфангит (Histoplasma farciminosus). Возбудители широко распространены в природе и обнаруживаются на слизистых оболочках млекопитающих.
Микозы часто возникают при ослаблении резистентности макроорганизма, на фоне других инфекций.
Аспергиллез — инфекционная болезнь птиц, реже млекопитающих. При заболевании отмечаются характерные поражения в основном органов дыхания, образование фибринозных узелков различной формы и цвета.
Мукоромикоз — хронический микоз животных и человека, характеризующийся поражением органов дыхания и лимфатических узлов с образованием казеино-известковых гранулем. Болеют многие виды животных и человек, заражение происходит аэрогенным и алиментарными путями.
Кокцидиоидомикоз — глубокий микоз, протекающий в виде доброкачественной гранулемы дыхательных путей и лимфатических узлов. Восприимчивы крупный рогатый скот, собаки, овцы, ослы, кошки, кролики, обезьяны и т.д. Источник возбудителя — больные животные. Заражение происходит аэрогенным путем, иногда алиментарным путем.
Кандидамикоз (молочница, оидомикоз) — заболевание животных и человека, характеризующееся поражением слизистых оболочек пищеварительного тракта с образованием творожистых пленок, грануломатозных процессов во внутренних органах. Обнаруживают поражения ротовой полости, молочной железы у коров, кишечника у свиней, иногда и кожи. Грибы рода Candida в естественных условиях патогенны для домашней птицы, млекопитающих и рыб (преимущественно поражается молодняк).
Ведущий фактор в патогенезе кокцидозной инфекции — состояние макроорганизма. Снижение резистентности организма ведет к активации, размножению гриба, который входит в состав нормальной микрофлоры слизистых оболочек.
Леницеллез — микоз человека и животных, сопровождающийся поражением ногтей, уха, верхних дыхательных путей, легких. Возможна генерализованная инфекция. Поражаются многие сельскохозяйственные животные и человек.
Специфическая профилактика и терапия отсутствуют.
Эпизоотический лимфангит — хроническая инфекционная болезнь однокопытных, характеризующаяся воспалением лимфатических сосудов кожи и подкожной клетчатки с образованием гнойных фонусов и язв. Возбудитель попадает в организм через поврежденную кожу. Переболевшие животные приобретают пожизненный иммунитет.
Диагностика микозов основывается на патологоанатомических данных, клинических признаках, аллергической пробе и лабораторных исследованиях, включающих микроскопию патологического материала, получение чистой культуры гриба.
Микотоксикозы — болезни сельскохозяйственных животных, возникающие после скармливания им кормов, загрязненных токсинами грибов, паразитирующих на вегетативных растениях, и отравления токсинами грибов-сапрофитов, поражающих корма во время их хранения.
Возбудитель: Claviceps paspali — вызывает клавицепстоксикоз — алиментарный токсикоз сельскохозяйственных животных, возникающий при поедании кормов растительного происхождения, пораженных спорыньевыми грибами. Токсин обладает нейротропным действием, содержится только в склероциях гриба, из которых выделяются алкалоиды.
Восприимчивы овцы, ослы, лошади, крупный рогатый скот, свиньи, гуси всех возрастов. Диагноз устанавливается на основании клинических признаков, анализа кормов, при выявлении склероциев и микотоксинов. Специфические средства профилактики отсутствуют, лечение симптоматическое.
Эрготизм — алиментарный микотоксикоз, возникающий при поедании хлебных, дикорастущих злаков, продуктов переработки с примесью рожков спорыньи. Возбудители эрготизма — Claviceps purpure и Claviceps microcephala, поражающие рожь, ячмень, овес, пшеницу в период вегетации. Чувствительны к ним животные многих видов, чаще поражаются крупный рогатый скот, овцы, свиньи, лошади. Токсины спорыньи вызывают у животных нервные симптомы, гангрену, диарею, сужение кровеносных сосудов, паралич, гибель.
Диагностика. В спорных случаях зараженность кормов определяют люминисцентным и химическим методами.
Стахиботриотоксикоз — остро или подостро протекающий микотоксикоз сельскохозяйственных животных, возникающий при поедании кормов, пораженных токсичным грибом Stachybotrys alternaus, растущим на сене и соломе. Восприимчивы лошади, свиньи и жвачные. Вспышка стахиботриотоксикоза отмечена у буйволов, лосей, бизонов. Стахиботриотоксин поражает центральную нервную и кровеносную систему.
Диагноз устанавливается на основании лабораторных исследований, которые заключаются в микроскопии патологического материала, выделении S. alternaus из кормов и определении его токсичности методом кожной пробы на кроликах.
Специфические средства терапии и профилактики отсутствуют.
Дендродохиотоксикоз — это остро протекающий микотоксикоз сельскохозяйственных животных вследствие поедания грубых кормов, пораженных грибом Dendrodochium toxicum. Дендродохины — цитоплазматические яды. Болеют лошади, овцы, собаки, кошки, куры, кролики. Диагноз устанавливается комплексно.
Специфические средства терапии и профилактики не разработаны.
Аспергиллотоксикоз — алиментарный микотоксикоз сельскохозяйственных животных, возникающий при скармливании кормов, пораженных грибом, чаще всего Aspergillus fumigatus (аспергиллофумигатотоксикоз), Aspergillus flavus (аспергиллофлавитоксикоз, афлатоксикоз). Токсины аспергиллов обладают местным (воспалительным) и общим (поражение центральной нервной системы, нарушение иммуногенеза) действием. Токсичность грибов устанавливают на лабораторных животных. Обнаружение афлатоксинов проводят методом тонкослойной хроматографии.
Фузариотоксикоз — алиментарный микотоксикоз, вызываемый грибами рода Fusarium: F. sporotrichiella, F. graminearum, F. nivale.
К фузариотоксикозам восприимчивы сельскохозяйственные животные всех видов. Токсины грибов поражают центральную нервную систему, желудочно-кишечный тракт, паренхиматозные органы, костный мозг. Токсичность корма проверяют на кроликах кожной , реакцией или подкожным заражением белых мышей, аквариумных рыбок, 1,5 —2-месячных цыплят, 9-дневных куриных эмбрионов.
Для диагностики разработаны серологические реакции.
Специфические средства терапии и профилактики не разработаны.
Инфекционный кератоконъюнктивит — острая инфекционная болезнь животных, характеризующаяся поражением глаз с развитием конъюнктивита и кератита. Восприимчивы крупный рогатый скот, овцы, козы, верблюды, свиньи и птицы. Источник возбудителя — больное животное. Насекомые являются механическими переносчиками возбудителя.
Окончательный диагноз устанавливается после микроскопического исследования мазков-соскобов с поверхности пораженной конъюнктивы.
Микозы — группа болезней, вызываемых патогенными микроскопическими грибами, активно паразитирующими в организме животного. К микозам относят и дерматофитозы — заразные заболевания кожи, характеризующиеся образованием на коже округлых шелушащихся, покрытых корками пятен с обломанными волосами.
Микозы животных
КЛАССИФИКАЦИЯ МИКОЗОВ
Микозы — грибные болезни животных, для которых характерно активное паразитирование патогенного гриба в живом организме. Практически животные всех видов восприимчивы к микозам. Некоторые из них опасны для человека, особенно для детей.
К группе микозов относят: дерматомикозы (трихофития, микроспория, парша), аспергиллез, кандидомикоз, кокцидиоидомикоз, эпизоотический лимфангоит, ринос- поридиоз, споротрихоз, гистоплазмоз, североамериканский бластомикоз, криптококкоз, мукоромикоз, сапро- легниоз и бранхиомикоз рыб, аспергиллез, аскофероми- коз и меланоз пчел, мускардину тутового шелкопряда.
Возбудителей микозов относят к низшим и высшим грибам, а также к актиномицетам. Они широко распространены в природе. В организме животных могут вызвать патологический процесс с локализацией преимущественно в коже, волосяном покрове, органах дыхания, пищеварительном тракте, мочеполовых органах и даже в мозговой ткани.
Микозы наблюдаются круглый год, но чаще в зимнеосенний период Преимущественно микозами поражаются молодые животные. Развитие болезни зависит от степени патогенности возбудителя, предрасполагающих факторов, устойчивости макроорганизма и условий внешней среды. Микозы возникают также как вторичные заболевания при поражении органов дыхания, на фоне диспепсии и дисбактериозов молодняка, обусловленных воздействием различных препаратов, особенно антибиотиков.
В основу современных классификаций микозов в области ветеринарной медицины положена способность грибов поражать те или иные ткани организма. Так, Н. А. Спе- сивцева (1964) подразделяет микозы на следующие четыре группы: поверхностные микозы кожи и ее производных, возбудители — грибы из группы Dermatophytes; глубокие микозы кожи, характеризующиеся появлением узлов в собственно коже и образованием язв (эпизоотический лимфангит, споротрихоз, североамериканский бластомикоз); висцеральные микозы с локализацией патологического процесса в органах дыхания или других органах (гисто- плазмоз, кокцидиоидомикоз, криптококкоз, риноспори- диоз, кандидомикоз, аснергиллез, мукоромикоз); микозы, вызываемые актиномицетами, для которых характерно хроническое течение и гранулематозное поражение органов и тканей (актиномикоз, актинобациллез, дерма- тофилез).
Все микозы животных С. В. Петрович (1989) условно разделяет на 2 большие группы: поверхностные и глубокие, или висцеральные, характеризующиеся, как правило, поражением внутренних органов и тканей.
Однако следует отметить, что в некоторых случаях поверхностные микозы (трихофития) могут сопровождаться поражением внутренних органов и глубоколежа- щих тканей, а висцеральные микозы (кандидоз) — лишь поражением кожи. Но такие случаи нетипичны и не могут оказать существенного воздействия на принципиальное разделение всех известных микозов на поверхностные и глубокие.
В группе висцеральных микозов целесообразно выделить плесневые микозы, которые обычно развиваются на фоне снижения общей резистентности организма. Самостоятельными группами считают также микозы рыб и пчел.
В последнее десятилетие у животных, в особенности у лошадей, стали все чаще регистрировать мицетомы, которые представляют собой опухолевидные поражения с образованием гранул, которые представляют собой компактные колонии возбудителей. Мицетомы вызываются многими существующими грибами, а также актиномицетами.
Несмотря на многообразие возбудителей мицетом, сходство клинических признаков позволяет выделить их в отдельную группу висцеральных микозов. Нередко мицетомы описываются под названием мадуромикоз, когда возбудителями являются грибы. Учитывая, что многие возбудители микозов вызывают заболевание не только у животных, но и у человека, необходимо остановиться на таком распространенном определении этой группы болезней, как зоонозы.
Термин зоонозы в истинном смысле означает болезни животных и произошел от греческих слов zoon — животное и nosos — болезнь. Впервые он появился в XIX в. в Германии и получил очень широкое распространение в медицине при описании болезней людей, заразившихся от животных. Зоонозы подразделяют на четыре группы: антропозоонозы (передача возбудителей от животных человеку);
зооантропонозы (передача от человека животным); амфиксенозы (передача в обоих направлениях: от человека животным и от животных человеку);
антропонозы (возбудители циркулируют только среди людей).
Несостоятельность такой классификации состоит в том, что одно и то же заболевание может относиться к нескольким указанным подгруппам.
Термин «зоонозы» подвергался неоднократному обсуждению на заседаниях Объединенного экспертного комитета по зоонозам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и Продовольственной и сельскохозяйственной организации (ФАО) и в окончательной редакции обозначен как болезни, которые естественно циркулируют между позвоночными животными и человеком, то есть инфекции, интоксикации, а также редкие случаи заражения животных от человека. Несмотря на недостатки такого определения, комитет экспертов счел необходимым оставить этот термин ввиду его широкого распространения в ветеринарии и медицинской практике.
Возбудителей микозов относят к низшим и высшим грибам, а также к актиномицетам. Они широко распространены в природе. В организме животных могут вызвать патологический процесс с локализацией преимущественно в коже, волосяном покрове, органах дыхания, пищеварительном тракте, мочеполовых органах и даже в мозговой ткани.
МИКОЗОВ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ПЛЕСНЕВЫМИ И ДРОЖЖЕПОДОБНЫМИ ГРИБАМИ. БИОПРЕПАРАТЫ
Цель занятия. Ознакомить студентов со свойствами возбудителей, методами микологического исследования и этапами лабораторной диагностики трихофитии, микроспории, аспергиллеза, пенициллиоза, мукоромикоза, кандидамикоза, эпизоотического лимфангита, кокцидиоидомикоза.
Оборудование и материалы. Материал от животных, пораженных трихофитией и микроспорией, культуры грибов рода Мисог, Aspergillus, Candida на плотной питательной среде Сабуро или др., препаровальные иглы, микологические крючки, предметные и покровные стекла, смесь воды, спирта, глицерина (поровну), 20%-й раствор гидроксида натрия или гидроксида калия, 50%-й водный раствор глицерина, плакаты, таблицы, биопрепараты.
Микозы — группа болезней животных и человека, вызываемых патогенными микроскопическими грибами. Основные методы лабораторной диагностики этих болезней: микроскопия, выделение и идентификация грибов-возбудителей.
Дерматомикозы. Заболевания кожи и ее производных. Восприимчивы сельскохозяйственные животные всех видов (преимущественно молодняк), пушные и хищные звери. У людей инфицированию более подвержены дети. Важным фактором заражения служит мацерация кожи.
Возбудители дерматомикозов — грибы дерматофиты, принадлежат к высшим, несовершенным (класс Deuteromycetes) грибам, широко распространены в природе. Они паразитируют на ороговевших субстратах, выделяя кератиназу, разлагающую кератин эпидермиса, волос, ногтей. К дерматофитам относят представителей трех родов: Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton (более 40 видов). В быту трихофитию и микроспорию называют «стригущий лишай».
Трихофития. Инфекционное заболевание. Характеризуется появлением на коже округлых или овальных облысевших очагов с мягкими, иногда сухими корочками в области головы. Поражения могут распространяться по поверхности тела животного (рис. 117, 118).
При поверхностной форме размер повреждений 1. 5см в диаметре, иногда развиваются более обширные очаги. Корки легко отделяются вместе со склеенными волосами, под ними на слегка влажной поверхности кожи торчат обломавшиеся волосы, кое-где встречаются папулы и пузырьки.
При глубокой форме болезни наблюдают несколько очагов поражения с ярко выраженными экссудативными и воспалительными процессами, инфильтрацию, большое количество фолликулярных пустул. Встречаются множественные экссудативные поражения. Все очаги покрыты засохшим серозно-гнойным экссудатом. При удалении корок обнаруживают эрозии. Часто отмечают осложнения секундарной инфекцией.
Основные возбудители трихофитии: у крупного рогатого скота, буйволов, зебу, оленей — Т. verrucosum (син. Т. faviforme), реже Т. mentagrophytes; у лошадей — Т. equinum и Т. mentagrophytes; у овец и коз — Т. verrucosum, Т. mentagrophytes; у свиней — Т. mentagrophytes; у верблюдов — Т. verrucosum, Т. sarkisovi; у собак и кошек — Т. mentagrophytes (кошки редко болеют трихофитией); у пушных зверей и кроликов — Т. mentagrophytes, редко Т. verrucosum; у лабораторных животных (мыши, крысы, хомяки, морские свинки) — Т. mentagrophytes; у птиц — Т. gallinae. Этот возбудитель известен давно как возбудитель парши (фавуса) преимущественно у рода куриных. Раньше болезнь называли «белый гребень».
Микроспория. Инфекционное заболевание кожи и ее производных. Появление очагов поражения сопровождается воспалительным процессом, обламыванием и выпадением волос, иногда наблюдают поражение когтей.
Основные возбудители микроспории: у кошек и собак — М. canis (син. М. lanosum); у лошадей — М. equinum, редко М. distorum и М. gypseum; у свиней — М. canis; у пушных зверей, кроликов — М. canis; у лабораторных животных — М. canis; у крупного рогатого скота и овец — М. canis и М. gypseum. Микроспорией болеют дикие звери, а также животные зоопарков и цирков.
Лабораторная диагностика трихофитии и микроспории основана на результатах микологического исследования.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и люминесцентного анализа, выделение чистой культуры посевом на специальные питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим свойствам.
Материал для исследования. В лабораторию направляют соскобы с пораженных частей тела животного вместе с корочками и чешуйками, пораженные волосы с участков, граничащих со здоровой кожей.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Чаще готовят неокрашенные (нативные) препараты. Исследуемый материал помещают в чашки Петри, измельчают ножницами и расщепляют с помощью скальпеля. Затем кусочки волос, чешуек, корочек переносят на предметное стекло, наносят каплю 20%-го раствора гидроксида натрия или гидроксида калия и слегка подогревают над пламенем горелки до отхождения паров. После этого добавляют каплю 50%-го водного раствора глицерина. На приготовленный препарат накладывают покровное стекло и просматривают сначала под малым увеличением сухого объектива (х 8), затем с объективом х 40 или с помощью иммерсионной системы.
С целью дифференциации грибов рода Trichophyton и Microsporum учитывают характер расположения спор в пораженном волосе (рис. 119, 120) (цепочками или мозаичное), пользуясь следующими критериями:
Люминесцентный анализ заключается в следующем. Исследуемый материал помещают в чашки Петри на расстоянии 20 см от ртутно-кварцевой лампы ПРК-2 или ПРК-4 с фильтром Вуда и просматривают под ультрафиолетовыми лучами в затемненном помещении. Пораженные возбудителем микроспории волосы дают яркое зеленоватое свечение. Корочки, чешуйки не светятся. Кроме того, с помощью люминесцентного анализа проводят раннюю диагностику атипичных и скрытых форм микроспории.
Обнаружение мицелия гриба и различных спор в материале — достаточное основание для постановки диагноза на дерматомикозы.
Выделение и идентификация культур возбудителей трихофитии и микроспории. Культуры выделяют в сомнительных случаях для подтверждения диагноза. Для получения чистой культуры грибов отдельные волосы или фрагменты кожи, корочки высевают на специальные питательные среды — агар Сабуро, сусло-агар, МПА, содержащий 2 % глюкозы, агар Чапека и некоторые другие. Чтобы освободить исследуемый материал от сопутствующей микрофлоры, перед посевом на питательные среды его обрабатывают 60%-м этанолом в течение 5. 7 мин, а затем дважды отмывают дистиллированной водой и подсушивают в термостате при 37 °С, или же в питательные среды добавляют антибиотики (пенициллин, стрептомицин и др.) из расчета 100. 200 ЕД/мл. Посевы инкубируют при температуре 26. 28 °С 20. 30сут и более. У выросших культур грибов изучают культуральные и морфологические свойства. Готовят препараты «раздавленная капля» (см. тему 5) и микроскопируют. При идентификации видов грибов руководствуются признаками, изложенными в таблице 35.
Биопрепараты. Препарат ТФ-130 (ВИЭВ) и сухая вакцина ЛТФ-130 (ВИЭВ) против трихофитии крупного рогатого скота содержат аттенуированный штамм Trichophyton verrucosum (faviforme).
Вакцина СП-I против трихофитии лошадей из штамма Trichophyton equinum.
Вакцина Триховис (ВИЭВ) сухая против трихофитии овец из штамма Trichophyton verrucosum (вариант автотрофикум).
Вакцину МЕНТАВАК против трихофитии пушных зверей и кроликов готовят из культуры Trichophyton mentagrophytes.
Вакцина МИКОЛАМ против трихофитии и микроспории плотоядных животных, нутрий и кроликов.
Поливак-ТМ — инактивированная вакцина против дермато-фитозов собак, включая 8 видов и разновидностей грибов рода Trichophyton и Microsporum.
Вакцина ВАКДЕРМ против дерматофитозов животных предназначена для борьбы с микроспорией и трихофитией собак, кошек, пушных зверей и кроликов. Готовят из высокоиммуногенных штаммов Microsporum canis, Microsporum gypseum и Trichophyton mentagrophytes.
Аспергиллез.Заболевание домашних и диких птиц, пчел, редко млекопитающих (крупный рогатый скот, овцы, козы, свиньи, лошади); восприимчив человек. Характеризуется гранулематозным поражением органов дыхания, в основном легких, нередко абортами. В легких при размножении возбудителя формируется аспергиллома. Аспергиллома (аспергиллезная мицетома) — шарообразная масса мицелия диаметром до 2 см (обычно Aspergillus fumigatus) и клеточного детрита, заполняющая полости легкого, образовавшиеся вследствие разрушения ткани. В отечественной практике этим термином обозначают любую инфекционную гранулему, вызванную видами Aspergillus.
Возбудители аспергиллеза принадлежат к высшим несовершенным грибам класса Deuteromycetes, рода Aspergillus, группе головчатых плесеней. Основные возбудители аспергиллеза животных — A. fumigatus, A.flavus, A. niger.
Лабораторная диагностика аспергиллеза основана на результатах микологического исследования.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культу-рально-морфологическим и патогенным свойствам.
Материал для исследования. В лабораторию направляют свежие трупы мелких животных, наложения, узелки, пораженные органы или их кусочки, мокроту, яйца.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Непосредственное обнаружение гриба в неокрашенном или окрашенном препарате имеет значение лишь для предварительного диагноза. При этом выявление характерных для аспергиллов органов плодоношения особенно ценно и значительно ускоряет лабораторную диагностику. Исследуемый материал помещают в смесь этанола с глицерином и водой поровну или в физиологический раствор. Препараты микроскопируют, как описано в теме 5, ориентируясь на обнаружение органов плодоношения (рис. 121) — головка, стеригмы со спорами (см. тему 5).
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Для посева используют агар Чапека, Сабуро, кровяной, мозговой, кукурузный агары, МПА (рН 5,5. 6,5). Гранулематозную ткань обжигают над пламенем, вырезают стерильно кусочки из середины и раскладывают их на плотную среду в чашки Петри, а экссудат засевают в пробирки со средой, инкубируют при 25 и 37 °С. На 3. 5-е сутки на плотных средах образуются характерные для аспергилл колонии (рис. 122. 124).
A.fumigatus на агаре Чапека образует разрастающиеся колонии — ровные или шероховатые. Развитый воздушный мицелий придает им войлочный вид белого цвета или, позднее, зеленого. Зрелые культуры в стадии спороношения черного цвета. С обратной стороны колонии бесцветны или желтовато-коричневого цвета. Межвидовая дифференциальная диагностика основана на различиях в строении стеригм и конидий.
В препаратах из культуры можно обнаружить гладкие, короткие, зеленого цвета конидиеносцы. Воздушные гифы бывают септированы и без перегородок. Колбообразные вздутия, содержащие споры, находятся только в верхней части гифов. У стеригм одноярусное строение. Конидии темно-зеленого цвета, округлые, шиповатые или полушаровидной формы.
A.flavus, A. niger на агаре Чапека формируют широко разрастающиеся колонии с обильным спороношением. Цвет колонии зависит от массы конидий, развивающихся на конидиеносцах. При микроскопии культур обнаруживают бесцветный или светлоокрашенный септированный мицелий. Часто образуются склероции шаровидной формы, представленные толстостенными клетками.
Биопроба. Метод применяют для подтверждения патогенности выделенных культур аспергилл. Кроликам, морским свинкам или белым мышам вводят внутривенно суспензию спор грибов (0,5. 1) • 10 6 , что вызывает развитие генерализованного процесса с типичным поражением органов дыхания, почек, сердца. При вскрытии в этих органах обнаруживают множество мелких узелков с интенсивным развитием гриба.
Птице скармливают корм, зараженный спорами аспергилла, или проводят ингаляцию спор в дыхательный аппарат.
С помощью микологических исследований дифференцируют аспергиллез от микозов, Вызванных другими плесневыми грибами.
Пенициллиомикоз. Заболевание многих видов животных, возникающее на фоне снижения общей резистентности организма и характеризующееся поражением кожи, слизистых оболочек.
Основные возбудители пенициллиомикоза — грибы рода Penicillium: P. crustosum, P. glaucum, P. mycetomagenum.
Лабораторная диагностика пенициллиомикоза основана на результатах микологического исследования. Диагностика данного микоза затруднена в связи с тем, что грибы рода Penicillium часто выделяют из легких и других тканей при туберкулезе и других инфекциях. Важным признаком для подтверждения диагноза служит обнаружение в очаге поражения элементов гриба, фагоцитированных макрофагами.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам.
Материал для исследования. В лабораторию направляют пораженные участки кожи, слизистых оболочек, пораженные органы и ткани от трупов.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Препараты «раздавленная капля» исследуют под микроскопом в окрашенном (по методам Грама, Циля—Нильсена и др.) и неокрашенном виде.
Важным диагностическим признаком служит обнаружение в нативных препаратах септированного мицелия и конидиеносцев, ветвящихся на вершине один или несколько раз в виде кисточки.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Материал высевают на сусло-агар, агары Чапека, Сабуро и др. и культивируют так же, как и возбудителей аспергиллеза и мукоромикоза. У выделенных культур грибов изучают морфологию колоний и внутреннюю структуру (табл. 36).
Биопроба. Заражают кроликов, морских свинок, крыс, белых мышей подкожно. На месте введения культуры грибов-возбудителей развивается абсцесс и формируется грануляционная ткань. При внутрибрюшинном и внутривенном введении развивается генерализованный процесс.
Мукоромикозы (мукорозы). Хронические заболевания, вызываемые плесневыми грибами. Характеризуются развитием гранулематозного процесса, сходного с туберкулезом, в лимфатических узлах и в легких, реже в других органах и тканях (кожа, ногти, слизистые покровы, пищеварительный тракт, центральная нервная система, мозг). К возбудителю мукороза восприимчивы свиньи, лошади, крупный рогатый скот, овцы, пушные звери; из лабораторных животных — морские свинки, мыши; болеют обезьяны, тюлени. Мукорозы людей встречаются в виде спорадических случаев.
Основные возбудители мукоромикоза — грибы видов Мисог mucedo, М. racemosus, Rhisopus nigricans и др.
Лабораторная диагностика мукоромикоза основана на результатах микологического исследования.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам.
Материал для исследования. Объектом исследования служат некротизированные ткани, гной, экссудат, гранулематозные ткани и др.
Микроскопия препаратов из исходного материала. В препаратах из исследуемого материала в положительных случаях обнаруживают несептированный мицелий. В круглых спорангиях на спорангиеносце видны эндоспоры (рис. 125). Для старого мицелия характерно присутствие хламидоспор.
Рис. 125. Четырехдневная культура Мисог racemosus на агаре Чапека:
3— спорангиоспоры внутри спорангии и вне ее;
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Гранулематозную ткань обжигают над пламенем горелки и стерильно вырезают из середины кусочки, которые раскладывают на поверхности среды Чапека (в чашках Петри) или других сред. Посевы инкубируют при 25. 30ºС. Культуры грибов довольно крупные, активно развиваются на искусственных питательных средах. На третьи сутки приобретают вид войлочных клочковатых серовато-белых колоний (рис. 126), в последующем цвет может изменяться до коричневого или бурого.
Рис. 126. Войлочно-клочковатая серовато-белая колония двухдневной культуры М. racemosus на агаре Чапека
Биопроба. Метод применяют для изучения патогенности выделенных из исходного материала культур гриба. Кроликам, морским свинкам и белым мышам вводят внутривенно, внутримышечно или внутрибрюшинно смыв спор и мицелия чистых культур. Гриб развивается во всех внутренних органах и тканях. Кролики погибают через 15. 20 дней после внутривенного заражения, мыши — через 5. 15 дней. Чаще поражаются почки, реже печень, сердце, селезенка (абсцессы, некроз эпителия канальцев, разрастание грануляционной ткани).
Кандидамикоз (кандидоз, молочница и др.). Заболевание животных и человека. Характеризуется поверхностным поражением кожи, слизистых оболочек ротовой полости, наружных мочеполовых органов. Возбудитель также вызывает висцеральный микоз с поражением дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы, молочной железы, мышечной, костной и сердечно-сосудистой систем, органов зрения. При генерализации кандидамикозного процесса могут поражаться многие органы одновременно (рис. 127). Следствием кандидамикоза у коров могут быть маститы, эндометриты и аборты.
Рис. 127. Серовато-белые мелкие узелки на слизистой зоба цесаренка, павшего от кандидамикоза
Основные возбудители кандидамикоза — С. albicans и С. tropicalis, реже С. krusei, род Candida, класс Deuteromycetes. Они широко распространены в природе. Наиболее часто их выделяют с поверхности различных фруктов, ягод, овощей. Candida albicans и др. входят в состав нормальной микрофлоры организма человека и животных. Любые нарушения функций иммунокомпетентных клеток или нормального микробного ценоза приводят к возникновению заболевания. С. albicans в основном поражает птиц, кур, гусей, уток, цесарок, индеек, голубей, фазанов и др. Более тяжело болеют поросята, телята, ягнята, щенки.
Лабораторная диагностика кандидамикоза основана на результатах микологического исследования.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культу-рально-морфологическим и ферментативным свойствам.
Материал для исследования. Объектом исследования служат пленки, наложения, соскобы со слизистой оболочки, содержимое язв и эрозий, кусочки внутренних органов.
Микроскопия препаратов из исходного материала. В тканях животных С. albicans может образовывать дрожжевые клетки и гифы, обнаружение которых имеет диагностическое значение (рис. 128). Клеточная стенка мицелия в этом случае состоит из трех слоев и значительно уступает по толщине пяти-семислойной структуре дрожжевых клеток.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Материал (кроме внутренних органов) берут стерильной бактериологической петлей и тщательно растирают петлей или стеклянным шпателем по поверхности среды. Кусочки печени, селезенки или почек погружают в спирт, обжигают над пламенем спиртовки, а затем из глубины органов вырезают кусочек ткани и проводят им по поверхности плотной среды. Кровь из сердца, содержимое желудка и кишечника, почечной лоханки высевают на агар Сабуро в чашки Петри. Посевы инкубируют при 37° С 24. 48 ч до появления на питательной среде колоний (рис. 129, 130).
Идентификацию культур грибов проводят в два этапа.
На первом этапе изучают культурально-морфологические признаки выделенной культуры в первичном посеве на плотной питательной среде (агар Сабуро, МПА с глюкозой) (табл. 37).
На втором этапе для окончательной идентификации грибов рода Candida выделенную культуру высевают на жидкие питательные среды (бульон Сабуро, картофельный, кукурузный агары или на аналогичные жидкие среды — кукурузный или картофельный отвар) и определяют культуральные признаки и цитоморфологические особенности. Посев на картофельный и кукурузный агары делают штрихом в толщу среды, разрезая петлей поверхность агара. При микроскопии учитывают наличие псевдомицелия, тип роста на этих средах; присутствие хламидоспор на кукурузном агаре в чашках Петри исследуют при малом увеличении (рис. 131).
Рис. 131. Пятидневная культура С. albicans на кукурузном агаре:
На жидких питательных средах грибы С. albicans через 24. 48 ч вызывают помутнение среды и образование рыхлого осадка на дне пробирки. Для грибов С. tropicalis и С. krusei характерны глубинный рост и образование пленки и пристеночного кольца.
Для дифференциации видов грибов рода Candida определяют ферментативную активность на жидких средах Гисса, содержащих 3 % различных углеводов и индикатор Андреде. Посевы наблюдают в течение 10. 15 дней, учитывают кислото- и газообразование. Ферментативные свойства приведены в таблице 38.
Эпизоотический лимфангит (бластомикоз, африканский сап). Хроническое заболевание животных. Характеризуется поражением лимфатических узлов, лимфатических сосудов и подкожной клетчатки с образованием язв, абсцессов и узелков. В отличие от дерматомикозов поражены более глубокие слои кожи. Болеют однокопытные животные: лошади, мулы, ослы, зарегистрированы случаи заболевания этим микозом парнокопытных — верблюдов и КРС (рис. 132).
Возбудитель эпизоотического лимфангита — Histoplasma farciminosus (син. Criptococcus farciminosus). Классификация криптококка неясна: одни исследователи причисляют его к бластомицетам, другие на основании некоторых биологических данных — к несовершенным грибам.
Лабораторная диагностика эпизоотического лимфангита основана на результатах микологического и серологического исследований.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя при микроскопии препаратов-отпечатков из исходного материала, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и серологическим свойствам.
Материал для исследования. В лабораторию направляют содержимое абсцессов, гнойный экссудат язв.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Готовят препарат «раздавленная капля». Чаще микроскопируют неокрашенный препарат или красят по Граму или Романовскому—Гимзе. Благодаря окраске гранулы в цитоплазме хорошо различимы. Возбудителя эпизоотического лимфангита относят к дрожжеподобным грибам. В исследуемом материале обнаруживают криптококки — клетки яйцевидной или ли монообразной формы с четко выраженной двухконтурной оболочкой, клетки заострены на одном или обоих концах. Размеры криптококков З. 5мкм в длину и 2. 3,5 мкм в ширину. В гное находят по 2. 3 криптококка, соединенных своими полюсами и иногда образующих цепочки (рис. 133). Часть криптококков можно найти в лейкоцитах (нейтрофилах и макрофагах). Центральная часть криптококков представляет собой гомогенное, полужидкое вещество, содержащее одно или несколько (2. 4) блестящих зернышек, которые находятся в беспрерывном и оживленном движении.
Необходимо учитывать, что для Н. farciminosus характерен диморфизм, т. е. морфология гриба в патологическом материале и в культуре различна.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. В сомнительных случаях микроскопии материал высевают на питательные среды. Первичное выделение гриба затруднительно, но выделенную культуру удается поддерживать сравнительно легко. Гриб выращивают на МППА, глюкозно-глицериновом МПА (содержание углеводов 2. 2,5 %), агаре Сабуро при температуре 25. 30°С.
Через 10. 12 дней на плотных питательных средах образуются колонии, сначала мелкие, в последующем более крупные, возвышающиеся над поверхностью среды. Колонии складчатые, сухие, кремового, а позднее коричневого цвета. В мазках из культуры дрожжевые клетки не обнаруживают. Вне живого организма гриб развивается в мицелиальной форме. Мицелий септированный, ветвящийся, многоклеточный.
Серологическая диагностика основана на результатах РСК с сапным антигеном.
Аллергическая диагностика. Для аллергической диагностики лимфангита используют гистоплазмин (Королевой) — фильтрат 3. 4-месячной культуры криптококка. При сомнительном результате лабораторного исследования применяют дифференциальную диагностику лимфангита и сапа, используя глазную пробу с маллеином и подкожную пробу с гистоплазмином.
Кокцидиоидомикоз (ревматизм пустыни, долинная лихорадка и др.). Хроническое заболевание животных и человека, характеризуется гранулематозным поражением лимфатических узлов, иногда легких у крупного рогатого скота и диссеминированной формой процесса со злокачественным течением у собак.
К заболеванию восприимчивы крупный рогатый скот, лошади, ослы, овцы, свиньи, грызуны (мыши, крысы и др.). Описаны заболевания койотов, лам, кенгуру, обезьян, тигров и других животных. Птицы не болеют. Кокцидиоидомикоз человека относят к группе особо опасных микозов.
Лабораторная диагностика кокцидиоидомикоза основана на результатах микологического и серологического исследований.
Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методами световой микроскопии и биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам.
Материал для исследования. Объектом исследования служат гной, кровь, содержимое очагов поражения и кусочки пораженных органов.
Микроскопия препаратов из исходного материала. Из материала готовят препараты «раздавленная капля». При работе с такими препаратами нужно соблюдать предельную осторожность, так как грибы остаются живыми. Можно микроскопировать препараты в 10%-м растворе щелочи при подогревании: в этом случае гриб погибает быстро, но происходит деформация сферул. Чтобы избежать заражения исследователя грибом С. immitis, перед микроскопией патологический материал рекомендуют залить 10%-м раствором формалина на 10. 15 мин. Такая обработка убивает гриб, но не влияет на его морфологические признаки. Положительным результатом считают обнаружение сферул (например, в гное и мокроте) мицелия (рис. 134, 135). Сферулы — образования правильной круглой формы с двухконтурной оболочкой и с многочисленными эндоспорами. Протоплазма зернистая. Диаметр сферулы от 20 до 120 мкм. Эндоспоры мелкие. Иногда обнаруживают сферулы с разорванной оболочкой и освобождающимися эндоспорами. Прорастание сферул в мицелий можно наблюдать непосредственно в патологическом материале. Для этого на предметное стекло наносят несколько капель в смеси с физиологическим раствором, покрывают покровным стеклом и для предохранения от высыхания заклеивают парафином по краям. Отсутствие сферул в препаратах при микроскопическом исследовании не дает оснований отрицать кокцидиоидомикоз.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Для посева исследуемый материал предварительно обрабатывают антибиотиками в течение 30. 60 мин для подавления бактериального роста. Пенициллин добавляют из расчета 20 ЕД/мл среды, стрептомицин — 40 ЕД/мл. Для получения мицелиальной формы гриба в качестве питательной среды используют агар Литмана, агар Сабуро, сусло-агар; для получения дрожжевидной формы — кровяной агар, печеночный агар с глюкозой, мартеновский бульон (табл. 39). Культивируют при 25. 27 и 35. 37 °С.
Биопроба. Заражают нативным материалом и солевой суспензией из чистой культуры гриба. К кокцидиоидомикозу восприимчивы мыши, морские свинки, кролики, собаки, куриные эмбрионы. При развитии патологического процесса в зависимости от метода введения исследуемого материала отмечают различные поражения.
При внутривенном введении культуры гриба развиваются абсцессы во внутренних органах, гибель животных наступает через 20. 30 дней.
При интратрахеальном заражении обнаруживают поражение легких и трахеобронхиальных лимфатических узлов.
При внутрибрюшинном заражении через 7. 10 дней процесс распространяется по брюшине с поражением внутренних органов.
При подкожном и интрацеребральном методах заражения возникает местный процесс с поражением лимфатических узлов.
При интратестикулярном — развивается гнойный орхит. В гное обнаруживают сферулы различных размеров и на разных этапах созревания, реже мицелий.
Двух-трехдневные куриные эмбрионы погибают через 3. 6 дней после заражения. Использованные в работе материалы и инструменты подлежат немедленной стерилизации в автоклаве.
Серологическая диагностика основана на результатах следующих реакций: РА с антигеном из убитой культуры, РСК с кокцидиоидином, РП с полисахаридным антигеном.
При работе с С. immitis необходимо соблюдать правила техники безопасности, в частности надевать марлевые маски. Посевы проводить лучше в пробирки со средой Литмана, мясо-пептонный бульон или другие жидкие среды, так как их удобнее использовать для микроскопических работ и заражения животных. На этих средах гриб образует более компактные, непылящие колонии. Пересев с твердых сред рекомендуют делать до начала спороношения.
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ
1. Приготовить и промикроскопировать препараты из материала от животных, больных дерматомикозом.
2. Изучить культуральные свойства возбудителей трихофитии и микроспории.
3. Изучить культурально-морфологические характеристики грибов родов Mucor, Aspergillus, Candida.
4. Ознакомиться с биопрепаратами.
1. Какие микроорганизмы вызывают дерматомикозы?
2. Какова схема лабораторного исследования на дерматомикозы?
3. По каким критериям дифференцируют грибы родов Microsporum и Trichophyton?
4. Какие плесневые и дрожжеподобные грибы вызывают микозы?
5. Какие вакцины применяют против дерматомикозов сельскохозяйственных животных?
Цель занятий. Ознакомить студентов с характеристикой мико-токсинов, вызывающих микотоксикозы, грибами-продуцентами этих токсинов и методами исследований для постановки диагноза на микотоксикозы.
Оборудование и материалы. Культуры грибов родов Aspergillus, PeniciUium, Fusarium, Stachybothrys и др. на агаре Чапека или других средах в чашках Петри (в больших пробирках), препаровальные иглы или микологические крючки, предметные и покровные стекла, микроскопы, таблицы и плакаты по данной теме.
Микотоксикозы. Болезни животных и человека; характеризуются отравлением, которое возникает при поедании кормов (пищи), содержащих токсические продукты жизнедеятельности микроскопических грибов-плесеней — микотоксины (от греч. mykes — гриб и toxinum — яд). Известно около 250 видов различных микроскопических грибов, продуцирующих 100 токсических метаболитов. Природными субстратами грибов-продуцентов микотоксинов служат разнообразные сельскохозяйственные культуры. К микотоксинам чувствительны почти все виды домашних, диких животных, птицы и рыбы. Наименование микотоксикоза происходит от названия токсина или гриба-продуцента. При диагностике микотоксикоза наибольшее внимание уделяют обнаружению токсина, поскольку гриб-продуцент в ряде случаев к моменту исследования погибает и, кроме того, один и тот же микотоксин могут синтезировать различные виды грибов.
Лабораторная диагностика микотоксикозов основана на результатах токсико-биологических, органолептических, микологических и физико-химических исследований.
Материал для исследования. В лабораторию направляют пробы всех кормов, входивших в суточный рацион животного в течение одного месяца до проявления болезни, а также остатки кормов из кормушек, содержимое желудочно-кишечного тракта павших животных и др. Отбор средних проб корма проводят ветеринарные и зооинженерные специалисты с представителями предприятий. Отобранную среднюю пробу делят на две части, упаковывают в чистые сухие стеклянные банки объемом 2. 3 л, герметически закрывают и пломбируют. Одну часть отправляют в лабораторию, другую хранят в хозяйстве в течение одного месяца в условиях, предотвращающих порчу или вторичное загрязнение. В документе указывают цель исследования, вид кормового средства, назначение, массу всей партии, место отбора пробы, основные клинические признаки у больных животных. Прилагают копию акта вскрытия трупов (при гибели животных), копию экспертиз ветеринарной лаборатории об исключении инфекционных болезней и отравлений животных химическими или растительными ядами (если такие исследования были проделаны лабораторией).
Органолептическое исследование. Определяют внешний вид, цвет, запах корма, выявляют признаки, отличающие дефектный корм от доброкачественного (изменение цвета; затхлый, плесневелый или гнилостный запах; наличие на поверхности корма мицелия гриба и др.). О санитарном качестве зерна можно косвенно судить по цвету и состоянию зерновых оболочек.
Токсикологическое исследование. Проводят на различных биологических моделях: кроликах, аквариумных рыбках гуппи породы Винер, белых мышах или сельскохозяйственных животных.
На кроликах ставят кожную пробу. К 50 г измельченного корма добавляют 150 мл диэтилового эфира (эфир для наркоза) или ацетона. Смесь встряхивают при комнатной температуре с помощью шуттель-аппарата 3 ч. Экстракт фильтруют и выпаривают до полного исчезновения запаха. Налет, оставшийся на стенках чашки, смывают небольшим количеством эфира и используют для биопробы, которую ставят на кроликах массой 2. 2,5 кг. Предварительно у кролика в области бедра, лопатки или бока выстригают участок кожи 6 см 2 . Пигментированная или с признаками шелушения кожа непригодна для исследования.
На одном кролике можно ставить не более четырех проб. На выстриженный участок кожи кролика наносят стеклянной лопаткой половину экстракта и легко втирают его. При восковидной консистенции экстракта его предварительно подогревают. Часть участка ос
Дата добавления: 2020-07-22 ; просмотров: 2245 ; ЗАКАЗАТЬ НАПИСАНИЕ РАБОТЫ
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Для посева используют агар Чапека, Сабуро, кровяной, мозговой, кукурузный агары, МПА (рН 5,5. 6,5). Гранулематозную ткань обжигают над пламенем, вырезают стерильно кусочки из середины и раскладывают их на плотную среду в чашки Петри, а экссудат засевают в пробирки со средой, инкубируют при 25 и 37 °С. На 3. 5-е сутки на плотных средах образуются характерные для аспергилл колонии (рис. 122. 124).