Техника оценки культуры грибов у собак и кошек

Дерматофия собак и кошек / Dermatophytosis of dogs and cats

Ключевые слова: дерматофития, кошки, собаки

Key words: dermatophytosis, cats, dogs

Дерматофития – достаточно часто встречаемая патология в практике мелких домашних животных-компаньонов, клиническая картина которой варьируется. для постановки диагноза, помимо анамнеза и клинического обследования, должны использоваться специальные диагностические методы – инструментальные и культуральные. потенциальный зооноз. лечение патологии комплексное и включает системные и местные средства.

Dermatophytosis – is a common infectious pathology in small animals veterinary practice. The clinical sings are variable. We should use, besides anamnesis and physical examination, the special trials (instrumental and cultural tools) for diagnosis. It is a potential zoonosis. The treatment should be mixed with topical and systemic therapies.

Дерматофития – группа инфекционных заболеваний, поражающих верхние слои кожи, волосы и когти. Возбудители – плесневые грибы аскомицеты родов Microsporum и Trichophyton – используют кератин в качестве питательного субстрата. Насчитывается около 40 видов грибов, из них в ветеринарной медицине мелких домашних животных особенно важны 4 вида – M. canis, M. gypseum, T. mentagrophytes, поражающие стержень волоса, и M. persicolor, поражающий роговой слой кожи. По характеру среды обитания и, главное, условиям передачи хозяину дерматофиты подразделяются на зоофильные (источник заражения – животные) и геофильные (источник заражения – окружающая среда) (табл. 1).

Инфекционным агентом служит артроспора, образуемая фрагментированными гифами. Инкубационный период в среднем составляет 7–14 дней. Механизм заражения связан с проникновением спор в волосяной фолликул в стадии анагена. Артроспоры адгезируются строго к кератину, повышенная влажность кожи облегчает процесс проникновения. Гифы мигрируют проксимально по поверхности волоса к луковице, продуцируя при этом кератолитические ферменты (кератиназу, эластазу, коллагеназу). Эти ферменты проникают через кутикулу волоса и прорастают до зоны кератогенеза. Волосы в стадии телогена продуцируют кератин медленно или не продуцируют его вообще, поэтому крайне редко могут поражаться.

С этим явлением связано спонтанное выздоровление при дерматофитозах. Однако артроспоры могут сохраняться на поверхности волоса до наступления фазы анагена, что приводит к реинфекции. Такие факторы, как возраст животного, его физиологический статус, количество и качество секрета потовых и сальных желез, характер роста волоса, играют немаловажную роль в развитии болезни.

Дерматит у больных животных развивается под воздействием протеолитических ферментов грибов (за исключением M. persicolor, который поражает роговой слой). Trichophyton spp. способны вызывать акантолиз кератиноцитов [9]. Компоненты грибов могут вызывать реакции гиперчувствительности с развитием гуморального и клеточноопосредованного иммунного ответа. Однако корреляции между циркулирующими антителами и защитой от инфекции не установлено. Лидирующим защитным фактором признан клеточно-опосредованный иммунный ответ, в пользу которого говорит более высокая встречаемость у иммуносупрессивных пациентов (раковые опухоли, FeLV, FIV, прием ГКС) [3, 12].

Длинношерстные животные заболевают чаще короткошерстных. Отмечена породная предрасположенность к дерматофитозам у персидских кошек, йоркширских и манчестер-терьеров.

Так как в первую очередь поражаются волосяные фолликулы, то клинические признаки будут связаны с проявлением фолликулита. В дерматологии собак отмечается гипердиагностика дерматофитии, так как демодекоз, поверхностная пиодерма мимикрируют под характерные «лишайные» поражения и часто упускаются ветеринарными врачами из виду.

Классические проявления дерматофитии связаны с локальной (иногда мультифокальной) алопецией и шелушением различной степени тяжести (рис. 1, 2). Инфекция чаще локализованная, максимально часто поражения отмечаются на морде, ушных раковинах, конечностях. Зуд варьируется от полного отсутствия или минимального до значительного, особенно при развитии поверхностной пиодермы. Онихомикоз – редкое явление, может быть представлен асимметричной паронихией и ониходистрофией. При генерализованной форме отмечаются себорееподобные поражения, проявляющиеся сальной шерстью. К такой форме болезни кошки склонны больше, чем собаки.

Болезнь характерна для молодых животных до года, однако столкнуться с ней можно в любом возрасте.

Собаки часто развивают классические округлые поражения с алопецией, шелушением, корочками, фолликулярными папулами и пустулами. В дифференциальной диагностике таких поражений следует учитывать все папуло-пустулезные болезни. Симметричные фолликулит или фурункулез области морды спинки носа и лицевой части головы могут мимикрировать под аутоиммунные болезни (пемфигус), особенно это касается поражений, связанных с возбудителями T. mentagrophytes и M. persicolor.

Керион – это хорошо очерченное, округлое, нодулярное проявление фурункулеза, чаще ассоциированное с грибами T. mentagrophytes и M. gypseum, в основном локализующееся на морде и конечностях (рис. 3).

Кошки более склонны к развитию участков алопеций с шелушением, волос в этих очагах обломан. Фолликулярный гиперкератоз может отмечаться в результате расширения волосяного фолликула или образования комедонов. Алопеции могут быть обширными со значительно выраженными воспалительными реакциями, эритемой, шелушением, корочками, фолликулярными папулами. Дерматофития области подбородка может проявляться акне. Для кошек характерно бессимптомное носительство длительное время.

Псевдомицетома – это редкое проявление дерматофитии, описанное у персидских кошек. Характеризуется одиночной или множественными подкожными нодулами, которыe могут изъязвляться [8] (рис. 4). Такие животные могут развивать как классические поражения на остальных частяхтела, так и нодулы без других клинических проявлений.

Дерматофиты имеют зоонозный статус. К группе риска относятся дети, пациенты с раковыми опухолями или трансплантатами, иммунокомпетентные и люди преклонного возраста. Клинические проявления у человека разнообразны и возникают на участках тела, контактирующих с шерстью животных (конечности, лицо, живот).

Диагноз основывается на следующих методах.

1. Люминесцентная диагностика при помощи лампы Вуда позволяет обнаружить M. canis, гифы которого содержат пигмент птеридин. В ультрафиолетовых лучах этот пигмент дает изумрудное свечение (рис. 5).

Не следует забывать, что перед использованием лампу необходимо хорошо прогреть (5–10 минут), исследование должно проводиться в абсолютно темном помещении. Отрицательный результат не исключает инфекцию! Святящиеся волоски удобно отбирать на микроскопию и посев.

2. Микроскопия. Для исследования отбираются подозрительные волоски и чешуйки кожи. При положительном результате визуализируются волосы, пораженные гифами грибов (рис. 6).

3. Грибковая культура. Наиболее достоверный способ диагностики дерматофитозов, позволяющий не только получить культуру на среде, но и идентифицировать возбудителя до вида. Наиболее часто используемые в практике среды – среда Сабуро (в модификации) и DNM.

Для кошек, подозреваемых в носительстве, пользуются методом МакКензи – вычесывание стерильной зубной щеткой всей поверхности тела и дальнейший посев собранных образцов волос, кожных чешуек. Растущие колонии M. canis и Trichophyton spp.– пушистые, имеют цвет от белого до бледно-желтого (рис. 7).

Средний рост колоний составляет от 7 до 30 дней. Для идентификации вида дерматофитов наносят на стекло каплю синей краски, помещают поверх скотч-отпечаток колонии, микроскопируют. Макроконидии M. canis крупные, веретеновидные, имеют толстые внутренние перегородки, разделяющие конидию на 6 и более отсеков. Обычно имеют крышечку на головном конце. Макроконидии M. gypseum не имеют крышечки на терминальном конце, внутренние перегородки тонкие, с меньшим количеством отсеков. T. mentagrophytes характеризуется сигарообразными макроконидиями, последних может быть значительно меньше, чем макроконидий округлой формы.

К сожалению, при посевах отмечаются ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

Цитологическая диагностика возможна с нодулярных или мокнущих поражений. Проводится скотч-отпечатком с последующей окраской образца стандартными красителями. Чаще образец представлен пиогранулематозным воспалением, с наличием спор грибов.

1. Гистопатология. Наиболее диагностичный результат дает PAS-окраска, которая позволяет прокрашивать гифы и споры внутри фолликула и эпидермиса. Не является рутинным методом, но гистопатологическое исследование незаменимо при подозрении на псевдомицетому.

2. В последние годы стали доступны такие методы диагностики, как ПЦР, иммуногистохимия, ELISA. Эти методы обладают хорошей диагностической ценностью, но повсеместно в практике не используются.

Дерматофитозы склонны к саморазрешению, однако лечить больных необходимо из-за высокой контагиозности как для других животных, так и для человека. Лечение заключается в использовании местных и системных средств. Местное лечение в монорежиме не обладает достаточной эффективностью, так как препараты не способны проникать внутрь волоса и волосяного фолликула. Однако вместе с системными препаратами позволяет ускорить выздоровление и пресекает излишнюю обсеменацию окружающей среды патологическим материалом. Доказанно эффективными местными средствами являются растворы энилконазола (Имаверол), сероводородной извести (Лайм Сульфур), шампуни на основе кетоконазола и миконазола.

Стрижка длинношерстных животных перед началом местного лечения позволяет удалить инфицированные волосы, предупреждая загрязнение окружающей среды и ускоряя процесс выздоровления.

Препараты для системного лечения представлены в табл. 2. Лечить необходимо всех животных в контакте. Здоровых изолировать от больных, в качестве профилактики можно использовать местные обработки.

Лечение отменяется после получения двух отрицательных результатов посева.

Обработка окружающей среды

Волос, зараженный артроспорами M. canis, может сохраняться до 18 месяцев в окружающей среде [11]. По данным зарубежных авторов, источником заражения служит и помещение ветеринарной клиники с встречаемостью дерматофитов до 30% [6]!

В связи с этим обработка среды обитания животных крайне необходима для успешного излечения. Для этого подходят следующие средства: 1% раствор хлорной извести, 0,6% раствор энилконазола, свечи и дымовые шашки на основе энилконазола [1].

Успешное использование противогрибковых вакцин хорошо зарекомендовало себя в лечении и профилактике дерматофитозов у продуктивных животных. Однако использование вакцин у животных-компаньонов не привело к ожидаемому успеху и является спорным [2, 3, 10].

В плацебо-контролируемых исследованиях кошки, привитые инактивированным вакцинным штаммом, имели высокий титр IgG (так же как и при естественной инфекции) и повышенную реакцию бласттрансформации лимфоцитов (но ниже, чем при естественной инфекции). Несмотря на это все, кошки в эксперименте развили дерматофитоз при инокуляции спор на кожу или при внедрении в колонии больных животных [8]. Разработка вакцин против дерматофитозов – перспективное направление. Но на текущий момент данные по эффективности отсутствуют [4, 5].

Литература

1. Carlotti D.N., Guinot P. et al. Eradication of feline dermatophytosis in a shelter: a field study. Veterinary Dermatology. 2010; 21(3): 259–66.

2. DeBoer D.J., Moriello K.A. et al. Safety and immunologic effects after inoculation of inactivated and combined liveinactivated dermatophytosis vaccines in cats. American Journal of Veterinary Research. 2002; 63: 1532–7.

3. Favrot C., Zaugg N. Incidence, immunity and treatment of feline dermatophytosis. Schweiz Arch Tierheilkd. 2005; 147(5): 205–12.

4. Frymus T., Gruffydd J. et al. Dermatophytosis in cats: ABCD guidelines on prevention and management. Journal of Feline medicine and Surgery. 2013; 15(7): 598–604.

5. Lund A.E., DeBoer J.D. Immunoprophylaxis of Dermatophytosis in Animals. mycopathologia. 2008; 166 (5-6): 407–24.

6. Mancianti F., Papini R. Isolation of keratinophilic fungi from the floors of private veterinary clinics in Italy. Veterinary Research Communications. 1996; 20: 161.

7. Moriello K.A. Management of dermatophyte infections in catteries and multiple-cat households. Veterinary Clinics of North America: Small Animal. 1990; 20: 1457.

8. Nobre M.O., Mueller E.N. et al. Disease progression of dermatophytic pseudomycetoma in a Persian cat. Revista Iberoamericana de micología. 2010; 27(2): 98–100.

9. Olivry T., Linder K.E. Dermatoses affecting desmosomes in animals: a mechanistic review of acantholytic blistering skin diseases.Veterinary Dermatology. 2009; 20 (5–6): 313–26.

10. Rybnika´r A., Vrzal V., Chumela J. Vaccination of dogs and calves against microsporum canis. Acta Veterinaria Brno. 1996; 65: 161–4.

11. Sierra P. et al. Fungal flora on cutaneous and mucosal surfaces of cats infected with feline immunodeficiency virus or feline leukemia immunodeficiency virus or feline leukemia virus. American Journal of Veterinary Research. 2000; 61: 158.

Key words: dermatophytosis, cats, dogs

Введение

Грибы рода Malassezia — это липофильные дрожжи, являющиеся представителем нормальной сапрофитной микобиоты кожного покрова теплокровных животных и человека. Они обитают на здоровой коже, потребляют жироподобные компоненты, выделяемые хозяином, при этом синтезируют вещества, ингибирующие жизнедеятельность бактерий и грибов. Однако при нарушении симбиоза между микро — и макроорганизмом, что обусловлено нарушением иммунологических защитных механизмов носителя (применение гормонотерапии, длительной антибиотикотерапии и т.п.), грибы рода Malassezia могут вызвать заболевание кожного покрова.

В настоящее время доказана наследственная предрасположенность и отсутствие передачи инфекта контактным путем (Faergemann J. 2001),а также не установлена зависимость частоты встречаемости от пола и возраста животного (Ross Bond 1997). Имеются данные свидетельствующие, что наличие гриба рода Malassezia при заболеваниях кожи способствует утяжелению процесса за счет аллергизирующего фактора (S. Johansson и K. Karlstrom 1993), в следствии способности индуцировать высокий уровень специфических IgE антител (Jensenjarolim E. 1992).

Так как грибы рода Malassezia являются частью нормальной микобиоты слухового прохода собак, сам факт выделения гриба еще не свидетельствует о его этиологической роли в возникновении отитов.

Целью настоящего исследования явилось определение взаимосвязи концентрации колонеобразующих единиц (КОЕ) грибов рода Malassezia в ушной раковине с клиническим проявлением отита у собак.

Материалы и методы

Исследование выполнено на базе питомника служебных собак и лаборатории микозов ВГНКИ. Пробы были отобраны из наружной ушной раковины 25 собак из них, 14 были клинически здоровыми и 11 собак с проявлением различных форм отита. Предварительно был выполнен сбор анамнестических данных и полный клинический осмотр. У собак с отитом отбор образцов проводился только при отсутствии терапии не менее 5 дней. С целью исключения отита паразитарной этиологии выполнялось микроскопическое исследование материала. Выделение грибов выполнялось единым методом для всех животных путем забора материала на жидкую транспортную среду с последующим пересевом на модифицированные нами селективные питательные среды. Посевы культивировали при температуре 350С в течении 7 — 14 дней. Идентификацию грибов рода Malassezia проводили на основании морфологических и ферментативных свойств с последующим подсчетом (КОЕ) в пробе.

Данные о животных и результатах исследования представлены в таблице 1. Таблица 1

№ порода грибы рода malassezia в КОЕ

Собаки с хроническим отитом 1 бобтейл 1100 2 далматин 1300 3 ам.кокер спаниель 850 4 черный терьер 140 5 чау — чау 960 6 б/п 46 7 б/п 640 8 кавказская овчарка 380 Среднее КОЕ 677 Выделено 100 %

Собаки с острым отитом 9 далматин 30 10 ам. стафф — 11 среднеазиатская овчарка 5 12 такса 14 Среднее КОЕ 16.3

При изучении чувствительности выделенных изолятов Malassezia pachydermatis к антифунгальным препаратам (нистатину, амфотерицину В, клотримазолу, флюконазолу, тербинафину) была установлена чувствительность этих дрожжей к нистатину и тербинафину.

На основании полученных результатов сделаны следующие выводы. Грибы рода Malassezia:

— являются компонентом микрофлоры наружной ушной раковины собак;

— не являются этиологическим фактором развития острых отитов;

— отмечена взаимосвязь между концентрацией КОЕ гриба рода Malassezia и появлением клинических признаков отита;

— определение концентрации КОЕ грибов рода Malassezia, является одним из диагностических показателей при отитах у собак.

1. Guillot J, Gueho E. The diversity of Malassezia yeasts confirmed by RNA sequence and nuclear DNA comparisons. Antonie van Leeuwenhoek 1995; 67:297-314.

2. Gueho E, Midgley G, Guillot J. The genus Malassezia with description of four new species. Antonie van Leeuwenhoek 1996,69:337-355.

3. Guillot J, Gueho E, Lesourd M et al. Identification of Malassezia species. A practical approach. J Mycol Med 1996; 6:103-110.

4. Guillot J,.1997.Epidemiological analysis of Malassezia pachydermatis isolates by partial sequencing of the large subunit ribosomal RNA. Res. Vet.Sci.62,22-25.

6. Faergemann J. Seborrhoeic dermatitis and Pityrosporum (Malassezia) folliculitis: characterization of inflammatory cells and mediators in the skin by immunohistochemistry. British Journal of Dermatology, 144 (2001), 3 (549-556).

7. Ross Bond BVMS Malassezia pachydermatis и заболевания кожи у собак. Waltham Focus vol 7 0 2, 1997 .

— являются компонентом микрофлоры наружной ушной раковины собак;

О грибах

Грибы присутствуют повсеместно в нашей окружающей среде. Из тысяч различных видов грибов лишь немногие обладают способностью вызывать заболевания у животных. Подавляющее большинство грибов являются либо почвенными организмами, либо патогенами растений. Однако описано более 300 видов грибов, которые могут быть патогенами. В природе существует пять царств: Monera (бактерии и сине-зеленые водоросли), Protista (простейшие), Fungus (грибы), Plantae (растения) и Animalia (животные). Грибы являются эукариотами, не содержат хлорофилл, могут расти в форме дрожжей (одноклеточных организмов), плесени (многоклеточных волокнистых организмов) или иметь смешанный тип роста. Клеточные стенки грибов состоят из хитина, хитозана, глюкана и маннана. Царство грибов включает пять подцарств: Chytridiomycota, Zygomycota, Basidiomycota, Ascomycota, а также Fungi Imperfecti или Deuteromycota.

Для обозначения разных частей грибов используют специальные термины:

• Гифа – нитевидное образование грибов, состоящее из многих клеток.
• Мицелий – это множество гифов.
• Септы – разделения между клетками внутри гифов.
• Конидии – неподвижные споры бесполого размножения у грибов (типы конидий: бластоконидии, артроконидии, аннелоконидии, фиалоконидии, пороконидии и алуриконидии).
• Конидиофор – мицелий, на котором расположены конидии.

Сапрофитные грибы на поверхности кожи собак и кошек

Микоз, дерматофитоз, дерматомикоз. В чем разница?

Дерматофиты, вызывающие проблемы у собак и кошек

Микроспория – наиболее частая клиническая проблема

Пути передачи микроспории

Устойчивость во внешней среде

Некоторые особенности развития инфекции

Предполагается, что для развития инфекции важна фаза роста волоса. Инфицирование волоса начинается и продолжается в фазу анагена. В фазе телогена может произойти спонтанное излечение. Также считается, что самоизлечение может наступить ввиду развития воспалительной реакции. Именно в этой связи дерматофития считается самоизлечивающимся заболеванием. Впрочем, артроспоры могут оставаться на волосяном стержне, однако повторное инфицирование конкретно этого волосяного фолликула наступит только после того, как опять начнется фаза анагена.

Диагностика микроспории включает в себя несколько аспектов:

• клинические данные;
• эпизоотологические данные;
• эпидемиологические данные;
• ЛЮМ-диагностику;
• прямую микроскопию волос (трихограмму);
• посев на питательные среды;
• биопсию (при необходимости).

Клинические данные. Классическое проявление микроспории у собак и кошек связано с наличием округлых алопеций (фото 1). Кожа может шелушиться, на ней обнаруживаются корки, фолликулярные папулы и пустулы. Иногда отмечается зуд, что связано с особенностью грибов выделять ферменты. Так, M. canis обладает многочисленными ферментативными свойствами, и, в частности, вырабатываемый фермент кератиназа способствует появлению воспаления и зуда.
У кошек могут быть как носительство и бессимптомное течение болезни, так и формы с минимальными клиническими данными, указывающими на дерматофитию.
Безусловно, диагноз «микроспория» (или любая другая разновидность дерматофитии) не может устанавливаться только на основании клинических данных, поскольку любая форма фолликулита клинически будет походить на данную проблему.

Эпизоотологические данные. Когда на приеме мы видим кошку или собаку, у которой можно подозревать микроспорию, важно выяснить, не было ли предварительного контакта у животного на выставках, не находилось ли оно в передержках, например на период отпуска владельцев. Если животное подобрано либо поступает к нам из приюта или из питомника, то подозрение в отношении возможного заболевания усиливается.

Эпидемиологические данные. Все наши лечебные и профилактические меры направлены на предотвращение возможности заражения владельцев от своих питомцев. В клинической практике, когда речь идет о микроспории, мы зачастую слышим жалобы от владельцев на наличие у них на коже округлых поражений, которые могут шелушиться и сопровождаться зудом. Бывают случаи, когда животное явно болеет, а у владельца нет поражений на коже. В этой ситуации важно предупредить владельцев о необходимости соблюдения минимального контакта с питомцем в течение периода проведения у него терапии. Однако бывают и такие случаи, когда у владельцев медицинскими дерматологами подтвержден диагноз «микроспория», а животное при этом не болеет. Обычно это происходит, когда у владельца был контакт с больным животным вне дома. В данном случае мы назначаем превентивную терапию домашнему животному и рекомендуем обработку внешней среды, поскольку риск дальнейшего перезаражения остается значительным.

ЛЮМ-диагностика. Люминесцентное свечение пораженных волосков при использовании лампы Вуда позволяет целенаправленно забрать их для прямой микроскопии и для посева. Но, к сожалению, этот метод достоверен только в 50 % случаев (фото 2, 3).

Трихограмма. Прямая микроскопия волоса является значимой для постановки диагноза «микроспория». Мы видим типичные волоски, разрушенные дерматофитом. В литературе описаны различные методы такой микроскопии.
Наиболее частой рекомендацией советского периода, которую можно увидеть в институтских методичках, было применение такого метода, при котором волос помещался в 10%-ный раствор КОН и подогревался над горелкой, что предполагало его разрушение, а споры таким образом попадали в раствор щелочи. Этот метод трудоемкий и не совсем безопасный. Одна моя коллега рассказывала, что когда на кафедре одной из ветеринарных академий они занимались такими исследованиями, то поражение грибами у сотрудников затронуло даже кожу лица. Это, по-видимому, было связано с тем, что споры попадали в окружающий воздух из-за нагревания, а оттуда – на кожу исследователей.
Некоторые источники рекомендуют для контрастирования спор использовать различные красители, вплоть до люминесцентных. Однако эти методы являются дорогостоящими, поэтому не могут быть рутинными.
Практика врача предполагает простой метод микроскопии подозрительных волосков при увеличении микроскопа в 40 раз. Если поле немного затемнить и при этом работать микровинтом, то хорошо видны споры грибов-дерматофитов (фото 4).

Посев на питательные среды. В ветеринарной практике используют посев на питательную среду Сабуро и среду DTM (англ. Dermatophyte test medium).
Среда Сабуро представляет собой агар, часто обогащенный компонентами, препятствующими росту колоний бактериальных микроорганизмов. Колонии грибов обычно растут в течение 14 дней. Они пышные и имеют серовато-белый цвет. Трудно по виду колоний определить их принадлежность к M. canis, поэтому важно исследовать сами колонии. Для этого надо поместить материал на скотч, окрасить его в синий цвет любым подходящим красителем и провести микроскопию. По характерному виду макроконидий, которые имеют обычно 6–7 септ (перегородок), можно подтвердить диагноз «микроспория» (фото 5).

В последнее время на рынке появились коммерческие пробирки для ветеринарии со средой DTM. Это селективная среда, по изменению окраски которой с желтоватого цвета до красного в период роста дерматофитов можно предположить наличие инфекции. Окончательный диагноз можно установить только посредством микроскопии колонии при обнаружении характерных макроконидий. Достоинство этой среды состоит в том, что мы видим ее красную окраску, так как растущие дерматофиты, питаясь сначала белками, находящимися в среде, меняют ее рН. Важно не пропустить этот момент, который возникает тогда, когда мы видим начало роста колонии. Однако необходимо помнить, что и другие грибы тоже могут менять цвет среды, тем самым вводя нас в заблуждение (фото 6). В нашей практике был прецедент, когда среда DTM меняла свой цвет при росте контаминирующего кожу гриба Aspergillus.
Именно микроскопия колонии является основным диагностическим аспектом, позволяющим увидеть макроконидии. А вот поместить клейкую ленту для отпечатка колонии в баночку с маленькой крышкой (в таком виде продается среда DTM) – довольно трудная задача. Наконец, DTM в несколько раз дороже среды Сабуро. Именно последнюю среду, не содержащую индикаторов, мы и предпочитаем в нашей практике для выращивания колоний дерматофитов.

Биопсия важна в тех случаях, когда мы сталкиваемся с керионом при дерматофитии или дерматофитной псевдомицетомой у персидских кошек, или когда речь идет о милиарном дерматите, предположительно вызванном дерматофитами, при наличии отрицательных посевов (особенно в случае имеющихся тех или иных данных «за» дерматофитию, например эпизоотологических или эпидемиологических).

Иные методы диагностики микроспории

Терапия микроспории

Препараты для системной терапии

Производные азолов

Кетоконазол – противогрибковый имидазол.
Действие: противогрибковое. Нарушает синтез эргостерола в стенках клеток грибов путем ингибирования 14-α-деметилазы, относящейся к системе цитохромов P450.
Ингибирует поглощение пурина и нарушает биосинтез триглицеридов и фосфолипидов.
Фармакокинетика: всасывание усиливается при введении вместе с жирами и небольшим количеством пищи. Высокие концентрации достигаются в печени, почках, гипофизе и надпочечниках. Выделяется с мочой, потом, кожным салом, ушной серой, слюной и молоком. Метаболизируется в печени до неактивных метаболитов, которые выделяются с желчью и фекалиями. Может потребоваться от 10 до 14 дней лечения (до достижения устойчивого уровня и эффективных терапевтических концентраций в коже).
Показания: противогрибковое средство (дерматофитоз собак, малассезиозный дерматит, локализованный или диссеминированный кандидоз, бластомикоз, гистоплазмоз, кокцидиомикоз и криптококкоз). Не рекомендуется для использования при лечении дерматофитоза кошек (предпочтительно использование гризеофульвина, итраконазола или флюконазола). Одновременно его использовали с циклоспорином для уменьшения скорости выведения и снижения требуемой дозы циклоспорина, что удешевляет стоимость лечения. Не является препаратом первого выбора для животных с заболеваниями центральной нервной системы или глаз.
Противопоказания: беременность, лактация, дисфункция печени, тромбоцитопения. Осторожно применять или не применять вообще препарат следует при приеме лекарств, метаболизирующихся ферментами P450. Следует избегать использования вместе с митотаном, рифампином и теофиллином.
Дозировка: собаки: дерматофитоз – 10 мг/кг каждые 24 ч; кошки: не рекомендуется для использования из-за высокой частоты побочных эффектов (потеря аппетита, потеря веса, гепатотоксичность).
Побочные эффекты: анорексия, рвота, диарея, потеря веса, лихорадка, депрессия, гепатотоксичность (гепатоклеточный некроз), тромбоцитопения, нерегенеративная анемия, тератогенный эффект, снижение синтеза кортизола и тестостерона у собак, снижение либидо, гинекомастия, азооспермия, импотенция, анэструс, зуд, потеря шерсти, осветление шерстного покрова, связанное с потерей остевых волос, а также катаракта после длительной терапии у собак.
Мониторинг: сывороточные уровни печеночных ферментов (аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы), билирубина, а также желчных кислот следует оценивать до начала лечения и во время терапии (каждые 2–4 недели).

Итраконазол – синтетический триазоловый противогрибковый препарат.
Действие: ингибирует 14-α-деметилазу, относящуюся к системе цитохромов P450, предотвращая синтез эргостерола в клеточной мембране гриба, слабо связывается с P450 млекопитающих.
Фармакокинетика: биологическая доступность составляет (приблизительно) 40 % натощак, повышается при введении вместе с пищей и кислом значении pH в желудке. Плохо проникает в ЦНС или ткани глаз. Метаболизируется в печени на неактивные метаболиты, которые выводятся с желчью и мочой.
Показания: дерматофиты, Malassezia, кандидоз, бластомикоз, гистоплазмоз, аспергиллез (низкая эффективность против назальной формы), криптококкоз, споротрихоз, зигомикоз, хромомикоз, онихомикоз, а также простейшие Leishmania и Trypanosoma. По сравнению с кетоконазолом обладает усиленной мощностью, сниженной токсичностью и более широким спектром действия.
Противопоказания: заболевание печени или печеночная недостаточность. Продлевает эффекты и повышает токсичность бензодиазепинов (мидазолама), циклоспорина, глюкокортикоидов, антигистаминных препаратов, хинидина, дигоксина, винкристина, варфарина, сульфонилуреазы. Противопоказан одновременно с антацидами, H2-блокаторами и антихолинергиками.
Дозировка: собаки: 5–10 мг/кг каждые 12–24 ч; кошки: 5 мг/кг каждые 12 ч или 10 мг/кг каждые 24 ч. Для кошек и мелких собак капсулы можно вскрыть и гранулы смешать с пищей. Дозировку можно сократить на 25–50 % при использовании суспензии для орального применения без пищи. Пульс-режимы дозирования можно использовать при лечении поверхностных грибковых инфекций. Так, при лечении дерматофитоза применяли дозировку 5 мг/кг в течение 7 дней через неделю, повторяя затем этот терапевтический курс с интервалами через неделю.
Побочные эффекты: рвота, диарея, боль в животе, потеря аппетита, повышение уровня печеночных ферментов в сыворотке, повышение азота мочевины в сыворотке, лихорадка, повышенное давление, кожная сыпь, периферический отек и язвы из-за кожного васкулита (наиболее часто встречается у собак, получающих более 10 мг/кг/день 2 раза в день). Может быть тератогенным, и его не следует давать беременным или кормящим животным.
Мониторинг: уровень печеночных ферментов необходимо отслеживать каждые 2 недели и прекращать введение лекарства при развитии каких-либо побочных эффектов. Можно снова попробовать начать лечение при 50%-ном снижении дозы после исчезновения побочных эффектов.

Действие: противогрибковое, ингибирует синтез стерола и цитохрома P450. Более высокая аффинность к ферментам грибов, чем у кетоконазола и итраконазола.
Фармакокинетика: высокая биологическая доступность (> 90 %), на всасывание в ЖКТ не влияют прием пищи и изменения значения рН в желудке. Хорошо проникает в ЦНС и ткани глаз, независимо от наличия воспаления
Показания: великолепный препарат против дрожжей, включая Cryptococcus, Blastomyces, Histoplasma, Coccidioides, Malassezia, Candida; обладает переменным действием против мицелиальных грибов, таких как Aspergillus и дерматофиты.
Противопоказания: дозировка снижается при почечной недостаточности, следует избегать применения препарата беременным животным. Циметидин может препятствовать всасыванию. Усиливает активность антикоагулянтов, тиазидных диуретиков, рифампина, циклоспорина, глипизида, антигистаминов, дифенилгидантоина и теофиллина.
Дозировка: собаки: 2,5–5 мг/кг каждые 12–24 ч; кошки: 5–10 мг/кг каждые 12–24 ч.
Побочные эффекты: рвота, диарея, дискомфорт в животе, кожная сыпь, гепатотоксичность (встречается реже, чем при применении кетоконазола и итраконазола). Не подавляет гормоны надпочечников или половые гормоны.
Мониторинг: оценивается уровень ферментов печени до и (ежемесячно) во время проведения лечения.
Дополнительная информация: в одном исследовании in vitro 30 изолятов M. canis было обнаружено, что все 30 являются устойчивыми к флюконазолу.

Тербинафин – аллиламин.
Действие: ингибирует биосинтез эргостерола и скваленэпоксидазы, что приводит к дефициту эргостерола в клеточной стенке гриба и внутриклеточному накоплению сквалена. Тербинафин обладает фунгистатическим и фунгицидным действием, поскольку он в основном не является ингибитором систем цитохрома P450. Является более селективным, чем азолы.
Фармакокинетика: всасывание усиливается при введении с жирной пищей. Высоколипофильный и кератинофильный. В высоких концентрациях находится в поте, кожном сале, коже, когтевых ложах и шерсти. Метаболизируется печенью и выводится с мочой. Местные препараты имеют минимальную всасываемость (

Биопсия важна в тех случаях, когда мы сталкиваемся с керионом при дерматофитии или дерматофитной псевдомицетомой у персидских кошек, или когда речь идет о милиарном дерматите, предположительно вызванном дерматофитами, при наличии отрицательных посевов (особенно в случае имеющихся тех или иных данных «за» дерматофитию, например эпизоотологических или эпидемиологических).

В современном мире постоянно совершенствующихся высоких технологий и невиданных информационных потоков различные метаморфозы произошли не только с человеком, животными, но и с микробиотами, в том числе и относящимися к царству грибов – микромицетов.

К концу ХХ века лидирующее положение занял антропофильный дерматофитный гриб – красный трихофитон, вызывающий рубромикоз гладкой кожи и ногтей – онихомикоз.

Статистический анализ заболеваемости дерматомикозами за последнее десятилетие показал, что число больных во всем мпире, в том числе и в Росийской Федерации, ежегодно увеличивается. Распространенность этих заболеваний в популяции, по различным данным, приближается к 10%Б 1 .

В настоящее время дерматофитозы собак, кошек (микроспория, трихофития) широко распространены в нашей стране и других странах мира. Они занимают одно из ведущих мест (от 7 до 61%) в патологии кожи и ее производных. Это связано с ростом численности бездомных животных, служащих основным источником возбудителя инфекции, высокой восприимчивостью собак к заражению, со способностью патогенных дерматофитов длительное время выдерживать неблагоприятные воздействия внешней среды, с отсутствием или несвоевременным проведением диагностических, лечебных и профилактических мероприятий 5 .

В последние годы подходы к диагностике грибковых заболеваний существенно изменились: если классический подход направлен только на обнаружение грибов-дерматофитов, то сейчас нам надо принимать во внимание резко возросшее видовое разнообразие потенциальных возбудителей (поэтому мы используем термин «дерматомикозы» вместо «дерматофитозы») 4 .

Нередко, исходя из практики, к врачу специалисту в области ветеринарной дерматологии направляются пациенты, диагностика дерматофитозов у которых была проведена некорректно. В следствие чего назначено неправильное лечение, не имеющее соответственно положительной динамики. Владельцы уходят из клиники, появляются негативные отзывы, врач также недоволен собственной работой.

Клиническая картина дерматомикозов весьма полиморфна, поэтому во всех случаях диагноз должен быть подтвержден данными лабораторного исследования.

Для лабораторной диагностики дерматомикозов используют микроскопический, люминесцентный, культуральный, иммунологический методы исследования. Лабораторная диагностика дерматофитозов и дерматомикозов состоит из нескольких этапов. В обычной клинической практике многие ветеринарные врачи ограничиваются микроскопическим и люминесцентным исследованием. При необходимости их дополняют культуральным исследованием.

Прежде, чем приступить к лабораторной диагностике дерматофитозов, ветеринарному врачу необходим тщательно собранный анамнез, список дифференциальных диагнозов.

Клинические симптомы дерматофитоза, вызванного например Microsporum canis у кошек могут варьировать от асимптоматического носительства до поражения кожи с образованием струпа. Типичное проявление заболевания — единичные или множественные, быстро распространяющиеся кольцеобразные поражения округлой или неправильной формы, сопровождающиеся эритемой, чешуйками7. Дерматофитные мицетомы или псевдомицетомы являются подкожными узловыми или изьязвленными формами со свищевыми ходами, видимыми у персов и, иногда, у других длинношерстных пород 2 .

Поскольку, клиническая картина может быть сильно вариабельна, дерматофитоз должен подозреваться почти у всех животных, но особенно кошек, которые имеют фокальную или мультифокальную алопецию, шелушение и корки; диффузную алопецию, себоррею и шелушение; узлы и свищевые ходы; воспаление, эритему, эрозии и язвы; и фолликулиты и фурункулезы 2 .

Самым частым патогеном у кошек является M.canis. У собак основными патогенами будут M.canis, M.gypseum и T.mentagrophytes. Стоит учитывать также географическую особенность для возникновения заболевания 3 .

Устройство и режим работы ветеринарной лаборатории являются важным, если не ключевым фактором в диагностике дерматофитии у животных. Лаборатория должна обеспечивать предупреждение рассеивания патологического материала в окружающей среде, чтобы избежать заражения и распространения инфекции.

Успех диагностики, в том числе и лабораторной, дерматофитозов во многом зависит от правильного взятия патологического материала, а также выбранных методов диагностики. В ветеринарной дерматологии чаще всего приходится иметь дело с микозами, при которых исследованию на патогены подлежат кожные чешуйки, волосы, когти.

За несколько дней или недель до исследования в очагах на коже, из которых предполагается брать патологический материал, необходимо прекратить всякое лечение 1 .

Распространённая схема диагностики базируется на люминесцентном тесте и прямой микроскопии патологического материала. Что касается первого метода, то он является ориентировочным и не может служить основанием для постановки диагноза, нередко даёт как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты, о чём большинство практикующих врачей осведомлены. В роли основного диагностического метода выступает микроскопия, главным достоинством которой является быстрота 4 .

Многие врачи пренебрегают предварительной обработкой участка, с которого будет набран материал. Непосредственно перед взятием патологического материала очаг поражения необходимо обработать 96% этанолом или раствором ксилитола. Материал лучше всего брать всего со свежих, но уже полностью развившихся очагов поражения.

В сравнительных исследованиях показано, что чувствительность микроскопического обнаружения артроспор дерматофитов не превышает 40%. Ветеринарный врач, ориентируясь исключительно на грибы-дерматофиты, упускает из вида все остальные грибные элементы, которые могут присутствовать в патматериале — разнообразные споры и гифы недерматофитных «плесневых» грибов, клетки и псевдомицелий дрожжей, клеточные структуры актиномицетов4. Микроскопическое исследование производят на обычном микроскопе без иммерсии. Препарат находят на стекле при малом увеличении х40, последующее исследование проводят на увеличении х100. Необходимо исследовать несколько препаратов, чтобы повысить надежность анализа и не получить ложноположительный результат. Для более четкого выявления элемента гриба производят мацерацию материала с помощью щелочи КОН, NaOH. Гифы грибов набухают и можно заметить на волосяном стержне утолщенные участки с неровными контурами. Споры образуют “чехол” вокруг волоса и придают ему смутные очертания.

Рис.1 Микроскопия пораженного волоса

Рис.2 Микроскопия пораженного волоса

Культуральное исследование является высокочувствительным методом лабораторной диагностики дерматофитозов. Данное исследование необходимо проводить независимо от результатов микроскопии, так как этот вариант диагностики позволяет выявлять возбудителя при отрицательных данных. Данный вид исследования позволяет определить род, вид возбудителя. Особенно полезен данный метод для диагностики латентных форм заболевания, асимптоматического носительства.

Информативным является тест “Dermatophyte Test Medium” или DTM-агар, который содержит Сабуро-агар, циклогексимид, гентамицин и хлортетрациклин и индикатор рН-среды фенол-красный.

Рис.3 Среда DTM при проведении исследования.

Дерматофиты предпочитают поглощать протеины. Далее, образуют щелочные продукты обмена, которые изменяют цвет среды на красный. Дерматофиты продуцируют эти метаболиты в процессе роста колонии, и изменение окраски среды происходит через 2-7 дней после посева (иногда этот процесс занимает 14 дней). Сапрофитные грибы метаболизируют углеводы, производя при этом нейтральные и кислые метаболиты, которые не меняют цвет среды. Правильно интерпретировать результат исследования можно только в случае ежедневного осмотра растущих колоний.

Следует учитывать, что чем больше фрагментов патматериала будет посеяно на среды, тем достовернее будут результаты. Данный вид исследования доступен как в специализированных лабораториях, так и в небольших ветеринарных лабораториях, при ветклиниках.

Иммунологические методы исследования используют для выявления специфической перестройки организма и серологической диагностики грибковых заболеваний. Метод ПЦР, в котором выявляется геном возбудителя, поэтому ПЦР позволяет точно дифференцировать возбудителя. Метод обладает высокой чувствительностью, поэтому даже минимальные количества возбудителя могут быть обнаружены в клиническом материале.

Сопоставление результатов серологических, культуральных и микроскопических исследований оказывается полезным для диагностики, и для прогнозирования течения дерматофитозов.

Следует уделить внимание и гистологическому исследованию. Патоморфологические изменения в очагах поражения обусловлены внедрением грибов в роговой слой эпидермиса, волосы и когти и ответной воспалительной реакцией кожи, которая может быть острой, подосторой или хронической.

Диагноз можно считать установленным только в том случае, если в гистологических препаратах обнаруживают элементы грибов. Собственно, грибы выявляются в небольшом количестве в виде нитей спор и мицелия.

Клинические симптомы дерматофитоза, вызванного например Microsporum canis у кошек могут варьировать от асимптоматического носительства до поражения кожи с образованием струпа. Типичное проявление заболевания — единичные или множественные, быстро распространяющиеся кольцеобразные поражения округлой или неправильной формы, сопровождающиеся эритемой, чешуйками7. Дерматофитные мицетомы или псевдомицетомы являются подкожными узловыми или изьязвленными формами со свищевыми ходами, видимыми у персов и, иногда, у других длинношерстных пород 2 .

• Определение частоты встречаемости и породной предрасположенности для дерматофитоза трудно, поскольку, он не является спонтанно встречающимся заболеванием, не включается в отчеты и не является фатальным заболеванием. Инфекция варьирует по тяжести и разрешается без лечения у многих собак и кошек. Все эти факторы способствуют недостаточной обьективности данных по частоте встречаемости и породной предрасположенности.
• Подкожные дерматофитные инфекции наиболее часто сообщаются у персидских кошек и йоркширских терьеров.
• Активно работающие и охотничьи собаки могут увеличивать свой риск контакта со спорами дерматофитов и, следовательно, способствовать поверхностным и, менее часто, узловым поражениям.
• Сероположительный статус по FIV и/или FeLV у кошек не увеличивает риск дерматофитоза

• 2.Диагностика

• Использование 2 раза в неделю limesulfur или шампуней с энилконазолом или миконазолом /хлоргексидином в настоящее время рекомендуется как эффективное местное лечение генерализованного дерматофитоза у кошек и собак.
• Препараты стабилизированной перекиси водорода (acceleratedhydrogenperoxide), также как шампуни с климбазолом и тербинафином показывают обещающие результаты, но не могут быть однозначно рекомендованы до получения in vivo исследований по оценке их эффективности.
• Шампунь с миконазолом эффективны in vitro, но in vivo наиболее эффективны, когда комбинируются с хлоргексидином. Хлоргексидин в качестве монотерапии плохо эффективен и не рекомендуется.
• Имеются некоторые данные, документирующие эффективность клотримазола , миконазола и энилконазола при лечении локализованных поражений. Они рекомендуются как дополнительные методы лечения, но не в качестве монотерапии.

• 4.Системное леченпе

• Гризеофульфин является эффективным, но имеет больше потенциальных побочных эффектов, в сравнении с итраконазолом и тербинафином.

• Луфенурон не имеет in vitro эффективности при дерматофитозе ,не предупреждает и не изменяет течение дерматофитной инфекции, не увеличивает эффективность системного противогрибкового или местного противогрибкового лечения и не имеет значения при лечении дерматофитоза.
• Противогрибковые вакцины не защищают против возможного воздействия, но могут быть полезной дополнительной терапией.

• 5.Дезинфекция окружающей среды

• Инфицирование из окружающей среды является редким.
• Минимизация контаминации может быть достигнута с помощью удаления поврежденных тканей, местного лечения и стандартной очистки.
• Ограничение свободы необходимо использовать с осторожностью и в течение наиболее короткого возможного периода времени.

• Дерматофитоз является излечимым заболеванием, но поведенческие проблемы и проблемы социализации могут быть пожизненными, если молодое или первично адаптированное животное соответственно не социализируется.
• Ветеринары должны рассматривать благополучие животных и качество жизни, когда выполняют эту рекомендацию.
• Инфекционный материал легко удаляется из окружающей среды; если его можно мыть, то он может быть деконтаминирован.

• 6.Зоонотические особенности

• Дерматофитоз является излечимым заболеванием, но поведенческие проблемы и проблемы социализации могут быть пожизненными, если молодое или первично адаптированное животное соответственно не социализируется.
• Ветеринары должны рассматривать благополучие животных и качество жизни, когда выполняют эту рекомендацию.
• Инфекционный материал легко удаляется из окружающей среды; если его можно мыть, то он может быть деконтаминирован.

• 6.Зоонотические особенности

Давайте будем совместно делать уникальный материал еще лучше, и после его прочтения, просим Вас сделать репост в удобную для Вас соц. сеть.